趋氧性在植物病原菌青枯雷尔氏菌细胞薄膜形成及其与番茄寄.docVIP

趋氧性在植物病原菌青枯雷尔氏菌细胞薄膜形成及其与番茄寄主互作中的作用 Jian Yao? and Caitilyn Allen* 翻译：周先治 摘要：青枯雷尔氏菌是一种土传病原菌，造成多种植物的细菌性枯萎。青枯雷尔氏菌寻找及感染寄主植物需要趋性，所谓趋性就是迁移至更适合环境的一种能力。然而，病原菌的特殊诱导信号未见报道。趋氧性（或者是能量趋性）是这种趋性之一，引导细菌达到最佳胞内能量水平。将青枯雷尔氏菌内编码趋氧性传感器的两个基因aer1和aer2克隆到大肠杆菌内研究这两个基因的功能，发现这两个基因在趋氧性传感中的功能不同。采用定位突变技术发现缺失其中的1个基因（aer1或aer2）或者这两个基因同时缺失的突变体与野生菌株相比趋氧能力显著下降；事实上aer基因突变体的趋氧性与完全丧失动力的菌株没有任何差别。番茄接种aer2突变体或aer1/aer2突变体的病情发展都显著延迟。最重要的是，与野生菌株相比，aer1/aer2双突变体快速定位番茄根部的能力显著受损。出乎意料的是所有的非氧趋性突变体在表皮形成比野生菌株厚的多的细胞薄膜。所有这些结果显示能量趋性对于青枯雷尔氏菌寻找定位寄主及其与寄主植物的相互作用有显著作用。 青枯雷尔氏菌是一种土传长棒状的β-变形菌纲(30)，造成细菌性青枯病。由于该病原菌地理分布广和寄主范围极为宽泛（超过50个属的植物），给全世界的农业生产带来严重损失。青枯雷尔氏菌能在水、土壤和感病的植物组织中长期存活，借由土、水、车辆和感病植物组织传播(30)。病原菌通过寄主根部伤口或者是自然孔（例如侧根根尖）侵入寄主。一旦病原菌侵入易感寄主植物它们就在根外皮和软组织导管的细胞空隙中定殖，最终沿着木质部到达植物的上部(59)。青枯雷尔氏菌的致病性十分复杂，细菌性青枯病的许多毒力因子已经被鉴定出来了，这些因子包括胞外多糖，几种植物细胞壁降解酶和一些III型分泌效应器(6, 20, 26, 32, 39)。细菌流动性，包括鞭毛驱动的游泳和纤毛驱动的颤搐(33, 56)。所有这些毒力因子都由一个复杂的调控系统控制，使细菌适应不同的生境。Phc（表型转换）系统是这个调控网的中枢(51)，phc系统受3-羟基棕榈酸甲酯这个钟摆感应分子的控制(15)。 许多细菌利用某种运动性来感应环境的刺激和移动到更有利的条件下生活，这种特性被称为趋性(7, 12),，趋性也直接涉及植物-细菌之间的相互作用(13, 21, 22, 28, 29, 62)。有关趋性的分子机制在大肠杆菌上已经进行了深入研究(55, 61)，大部分真细菌都有这种特性。细胞膜相关受体（也称为甲基接受趋化蛋白[MCPs]或者是传感器）感应环境刺激后做出对应的变化。这些反应导致细胞间组氨酸激酶磷酸化（CheA），CheA与MCPs通过双蛋白相关（CheW），CheA然后将它的磷酸部分传给CheY，一个可传播的细胞间反应调控器。磷酸化了的CheY通过结合到鞭毛发动机上改变了鞭毛自动，结果导致网状移动到适宜的环境远离有害的环境(55, 61)。 我们原来研究发现番茄的根部分泌物能吸引病原菌青枯雷尔氏菌K60菌株，并且发现病原菌依靠趋性寻找并在寄主植物根部定殖(62)。非趋性的cheA和cheW青枯雷尔氏菌突变体的致病性下降，与野生菌株相比这些突变体在根部的定殖能力下降(62)。然而，由于这些突变菌株缺乏所有形式的趋性，我们没有发现任何类型的趋性的功能，例如对特殊化合物的趋化性或者是趋氧性。 趋氧性，更确切的说是能量趋性，是一种引导细菌细胞寻找并定位在哪里他们可以达到最佳的细胞内能量水平，这种感应是通过电子链传递达到的(58)。通常是这样的，但不是所有情况下都能达到最佳的氧气浓度(58)。运动型细菌普遍具有能量趋性，并且能量趋性在细菌的生命周期中具有重要的生态作用(1, 58)。大肠杆菌的趋氧性的分子机制已进行了深入研究，通过监测细胞能量变化状况发现两个细胞膜相关受体蛋白Aer 和Tsr与趋氧性传感器的作用一样(11, 18, 23, 27, 48, 49, 60)。与植物相关的细菌中，研究发现铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa和恶臭假单胞菌P. putida的Aer受体蛋白在趋氧性的信号转换方面有重要作用(31, 43)，氧对固氮螺菌Azospirillum brasilense的化学感应蛋白在调节能量趋性和促进根部定殖方面有重要作用(28)。虽然趋氧性行为在40多年前就在青枯雷尔氏菌上发现(35)，趋氧性在这个病原菌生活周期中的作用仍然未知。 在本研究中，我们在青枯雷尔氏菌K60菌种中鉴定了两个趋氧性必需受体蛋白Aer1 和Aer2，这两个蛋白的功能与大肠杆菌的趋氧性传感器的功能相同。我们研究证实青枯雷尔氏菌的毒性和在寄主植物根部的快速定殖需要趋氧性