微孔板制备的新视角.pdfVIP

CELL BIOLOGY TECAN JO URNAL 3D细胞培养分析技术 微孔板制备的新视角 阿斯利康中国创新研究中心 中国创新研究中心 （ICC ）是阿斯利康 早已成熟应用于化合物梯度稀释和其 （ICC ）的科学家们开发了一项 在中国上海张江高科技园区投建的研 他大量细胞检测实验中，可以在保持 发基地。该中心于2007 年正式投入使 原有应用的基础上快速且低成本地修 新技术，利用Tecan 全自动液 用，专注于调查研究影响亚洲人口健 改应用程序。 体处理工作站Freedom EVO® 进 康的各类疾病，其中包括 ：胃癌、肝 行细胞培养微孔板自动化温控 癌以及肺癌。该中心采用国际一流的 ICC 资深自动化科学家William Shi 解释 制备，进而完成药物候选化 先进技术解析这些癌症的遗传机理， 说 ：“历来此类3D 细胞检测都是在6 合物筛选。该研究团队在BD 并在临床上识别及确证相关的生物标 孔板上进行的，由于样本需求量大且 记物和药物靶标。 Mat rigel 底物处理比较复杂，因此手工 Mat rigel ™加样前使用琼脂预涂 制板十分困难。并且，这种6 孔板型 微孔板，从而顺利地在96 孔微 由Yi Gu 博士带领的细胞科学研究部门 无法与大量试剂需求和大批量化合物 孔板上实现3D 细胞培养分析。 正在对这些疾病开展一项药物研究项 筛选工作相匹配，因此我们开始着手不 目，希望通过筛选多种化合物来确定 断寻找高性价比的方法。另一点很重 候选药物。3D 细胞检测分析是该项目 要的是，Mat rigel 的异质组分具有较大 组基于采用BD Mat rigel (BD Biosciences) 表面张力且在微孔内分布不均，其低 作为细胞培养底物进行的二次药筛 剂量加样非常困难，因此分析6 孔板 技术其中的一种。Mat rigel 是从 EHS 上的实验结果已经极其困难，更别提 (Engelbret h-Holm-Swarm) 小鼠肉瘤的可 在96 孔板内检测分析了。为了解决这 溶性基底膜抽提得到的细胞外蛋白凝 一问题，我们先在微孔板上预涂一层 胶复合物，能够诱导克隆细胞在标准 薄薄的琼脂，然后再进行Mat rigel 加样。 细胞培养基表面通过不同方式生长（图 这种方法虽然解决了Mat rigel 的表面张 1 ）。这些非均相构成诱发了克隆体的形 力问题，却带来了如何平衡在50℃以 成，非常适用于研究肿瘤细胞之间的 下琼脂凝固与４℃以上Mat rigel 过度粘 粘附、生长、迁移及转移。由于克隆 稠这两种物质的复杂加样问题。” 细胞很好地模仿了人体组织的生长与 成型过程，因此研究人员能够在药筛 后来我们选用了全自动化液体处理工 最初期识别正确的化合物。 作站Freedom EVO ，其中选配了多个温 控载架，使得盛装琼脂和Mat rigel 的液 手工制板存在着明显的两个缺陷 ：容 槽一直保持适宜的温度，非常便于加 易出错且耗费时间，而通过使用全自 样。整个加样过程都是由自动化系统