黑鲷精子的超低温冻存及DNA损伤的SCGE检测.pdfVIP

动 物 学 研 究 2009 ，Apr. 30(2): 151−157 CN 53-1040/Q ISSN 0254-5853 Zoological Research DOI ：10.3724/SP.J.1141.2009.02151 黑鲷精子的超低温冻存及 DNA 损伤的 SCGE 检测 1 1, * 2 1 3 叶 霆 ，竺俊全 ，杨万喜 ，魏 平 ，吴雄飞 （1. 宁波大学 教育部应用海洋生物技术重点实验室，浙江 宁波 315211 ；2. 浙江大学 生命科学学院，浙江 杭州 310012 ； 3. 宁波市海洋与渔业研究院，浙江 宁波 315012 ） 摘要：以0.5mL 的麦细管为冻存管和DMSO 为抗冻剂进行超低温冷冻黑鲷精子，对冻精核DNA 的损伤情况 进行单细胞凝胶电泳（SCGE ）检测，其结果表明，以Cortland 溶液为稀释液，5%、10%、15%及20%DMSO 为 抗冻剂的超低温冻存的黑鲷精子活力、受精率与鲜精无显著差异。其中以10%DMSO 为抗冻剂的冻存效果最佳， 冻精的激活率、运动时间、寿命及受精率分别达（92.91±1.25 ）%、（39.90±2.70 ）min 、（53.82±2.84 ）min 及（89.35±1.99 ） % ；而以25%及30%DMSO 为抗冻剂时，冻精活力及受精率显著下降。SCGE 检测结果显示，DMSO 浓度为5%、 10%、15%及20% 时，黑鲷冻精与鲜精的彗星率及损伤系数差异不显著；DMSO 浓度为25%及30%时，冻精与鲜 精的彗星率及损伤系数差异显著；冻精的彗星率与抗冻剂DMSO 浓度成正相关。黑鲷鲜精及冻精核的DNA 损伤 主要为轻度和中度损伤，重度损伤比例较低，完全损伤仅存在于25%及30%DMSO 为抗冻剂的冻精中，且比例低。 分析认为，较高浓度的DMSO 是引起冻精核DNA 损伤的主要原因。 关键词：黑鲷；精子；超低温冻存；精子活力；受精率；DNA 损伤；单细胞凝胶电泳 中图分类号：Q959.483 ；Q492 文献标识码：A 文章编号：0254-5853-(2009)02-0151-07 Sperm Cryopreservation in Sparus macrocephalus and DNA Damage Detection with SCGE 1 1, * 2 1 3 YE Ting , ZHU Jun-quan , YANG Wan-xi , WEI Pin , WU Xiong-fei (1. Key Laboratory of Applied Marine Biotechnology by the Ministry of Education, Ningbo University, Ningbo 315211, China; 2. College of Life Science, Zhejiang University, Hangzhou 310012, China; 3. Ningbo Academy of Oceanology and Fisheries, Ningbo 315012, China) Abstract: In this paper, DMSO