慢性间歇性缺氧对大鼠认知功能及海马CA1区超微结构的影响.pdfVIP

维普资讯 中华老年医学杂查 !生 旦箜 鲞笙 塑 』鱼!!竺!! !型 !! ． 基 础 研 究 · 慢性问歇性缺氧对大鼠认知功能及 海马CA1区超微结构的影响 杨宇 谭胜玉 张新 民 罗荧荃 我们于 2005年 4月至 2006年 1月通过建立 60min。每次实验大 鼠在 4个不同象限中将头朝 慢性间歇性缺氧大鼠动物模型 ，观察慢性间歇性缺 池壁放入水池 ，每天次序不同，任其游泳 ，直至找 氧对大 鼠认知功能及海 马内神经元超微结 构的影 到平台。6OS内寻找到水下平台的时间(逃避潜伏 响 ，为进一步探讨慢性间歇性缺氧导致认知功能障 期)被记录下来，并允许大鼠在平台上停留 10S以 碍发病机制提供形态学依据。 达到强化记忆效果；如果大 鼠在 60S内未到达平 一 、 材料和方法 台，逃避潜伏期以60S记录，并由实验者用杆子将 1．材料 ：(1)Sprague-Dawiey雄性大 鼠16只， 其引至平台停留 30S，此项反应大鼠的学习能力。 体重 (190-4-20)g，由中南大学湘雅二医院动物实验 ②空间探索实验 (spatialprobe)：实验第 6天进行 ， 部提供 ；(2)间歇低氧舱 (本实验室设计)：由有机玻 撤除平台，任意选 1个人水点将大 鼠放入水 中，记 璃舱、HBO一2B型探氧仪 (浙江建德梅城 电化分析 录其在 2min内的游泳轨迹 ，分别计算其跨越 目标 仪器厂提供)、氮气储气瓶程控仪和排气装置 4个 象限内的游泳时间占整个游泳时间的百分率 、跨越 部分组成 ；(3)Morris水迷宫 ：中南大学湘雅二 医 平台次数 ，此项反应大 鼠的空间记忆能力 。(3)进 院精神病学研究所制备 ；(4)TEM 电镜 ：日本 行 Morris水迷宫检测后 ，所有大 鼠均行腹腔注射 HITACHI一7500；(5)削块机 (LEICAEM TRIM)： 戊巴比妥麻醉，剖开腹腔，再打开胸腔 ，从左心室插 管至升主动脉 ，同时剪开右心耳 。先以生理盐水快 德国LEICA；(6)切片机 (LEICAEM UC6)：德国 速冲洗 ，再用 4 多聚甲醛进行灌注固定 。灌注完 LEICA；(7)CCD成像系统 (MegaViewm)：德 国 毕后 ，取脑组织 。(4)剥离海 马 ，将 CA1区切成 SoftImagingSystem；(8)戊二醛 、锇酸 、EPON812 1mm×1mm×1mm 大小 ，固定 于 2．5 戊二醛 包埋剂 、醋酸铀与柠檬酸铅染色剂 ：均为 Toolsfor 中，环氧树脂 Epon812渗透 、包埋和超薄切 片 ，醋 Scienceandindustry。 酸铀及柠檬酸铅双重染色，在 日产 HITACH一7500 2．方法 ：(1)动物分组与模型的建立 ：适应性 透射电镜下观察并摄片。 饲养 3d后 ，16只 SD大 鼠分为 ：正常组 8只，在正 3．统 计 学 处理 ：所 有数 据应 用统 计软 件 常环境中以普通饲料、普通饮水饲养 8周 ；实验组 SPSS11．0进行统计分析。所有参数均以均数±标 8只，每 日间歇缺氧 7h，以普通饲