中国明对虾serpin型丝氨酸蛋白酶抑制剂基因的重组表达及活性分析.pdfVIP

第 卷第 期 水 产 学 报 年 月 文章编号 中国明对虾型丝氨酸蛋白酶抑制剂 基因的重组表达及活性分析 王丹丹 刘逸尘 张亦陈 孙 妍 耿绪云 孙金生 天津师范大学生命科学学院天津市动植物抗性重点实验室天津 天津市水生动物疫病预防控制中心天津 摘要 家族成员作为主要的丝氨酸蛋白酶抑制剂通过调节一系列丝氨酸蛋白酶和半 胱氨酸蛋白酶的活性来调节蛋白酶级联反应进而参与了包括血液凝结补体激活纤维蛋白 溶解炎症反应肿瘤抑制和激素转运等大量的基本生物过程在调节机体免疫及其它重要生 理功能等方面发挥着重要作用 在前期研究中从中国明对虾血细胞中克隆得到一个 型丝氨酸蛋白酶抑制剂基因 登录号 初步研究显示它在转录 水平参与了病原菌和白斑杆状病毒 引发的中国明对虾先天免疫应答反应利用原核 重组表达系统成功获得了重组的中国明对虾 型丝氨酸蛋白酶抑制剂 纯 化复性后得率为 活性分析显示重组目的蛋白 对多种病原菌的生长均有 一定抑制作用研究结果进一步证实它参与病原微生物引发的对虾防御应答过程为探讨甲壳 动物先天免疫防御应答机制提供了有价值的参考 关键词 中国明对虾 丝氨酸蛋白酶抑制剂 重组表达 抑菌活性 中图分类号 文献标志码 丝氨酸蛋白酶是一类重 家族 甲壳动物中的则主要分属于 要的蛋白水解酶广泛存在于动植物及病原微生物 和 家族 家族结构序列高度 中介导了机体中很多重要的免疫反应如血淋巴 同源端为反应中心环区 凝结补体激活黑化吞噬和包囊等 而丝氨 其 位点决定成员的抑制专一性靶酶识 酸蛋白酶抑制剂 作 别的机制为诱导构象改变模型 节肢动物的 为分子开关调控着这些反应的进程 通过调 在免疫调节与防御中发挥着重要作用例如凝 控活力参与蛋白酶级联反应它作为精确调节 结作用 级联反应细胞因子激活和对病原 活力的控制因子可以防止蛋白酶的过量激活 的选择消化抑制真菌和细菌蛋白酶的活性等从而 从而避免宿主自身组织的损伤和破坏 主要 保护机体免受病原微生物侵害 存在于血浆或血细胞的颗粒中共同参与一系列重 目前在甲壳动物的 的研究中仅在鲎 要的生理功能包括参与消化作用受精作用血液 三疣梭子蟹 凝结纤维蛋白溶解胚胎发育和免疫过程等 拟 穴 青 蟹 节肢动物血淋巴中已经发现的丝氨酸蛋白酶抑制 和 斑 节 对 虾 剂可根据其结构特点结合机制和功能分为 个 中有相关报道主要围绕其基因 家族家族家族 巨球蛋白家族