草鱼呼肠孤病毒HZ08株S10编码蛋白多克隆抗体制备及其特性分析.pdfVIP

第 卷第 期 水 产 学 报 年 月 文章编号 草鱼呼肠孤病毒 株 编码蛋白 多克隆抗体制备及其特性分析 李永刚 曾伟伟 王 庆 殷 亮 王英英 梁红茹 刘 春 石存斌 吴淑勤 中国水产科学研究院珠江水产研究所农业部渔药创制重点实验室广东 广州 上海海洋大学水产与生命学院上海 摘要 为研究草鱼呼肠孤病毒 株 基因节段编码蛋白的可能功能采用 方法扩增草鱼呼肠孤病毒 株 基因节段并把该基因节段克隆至表达载体 获得的重组表达载体 转化到大肠杆菌 菌株用 诱导表 达表达产物通过 分析鉴定后再通过变性过柱纯化透析复性纯化获得目的 蛋白 然后用纯化的重组蛋白免疫昆明小白鼠制得多克隆抗体用间接 方法测定抗 体效价用 和 间接免疫荧光试验 鉴定抗体特异性 结果表明 分析表达的重组蛋白约为 大小与预期相符 目的蛋白主要存在于包涵体中过柱纯 化透析复性纯化后的重组蛋白纯度可达 间接 测得制备的多克隆抗体效价约 为 和 结果显示制备的多克隆抗体能识别 毒株表明 编码 蛋白为 株的结构蛋白 关键词 草鱼呼肠孤病毒 株 编码蛋白 多克隆抗体 中图分类号 文献标志码 我国分离到的第一株鱼类病毒是草鱼呼肠孤 株 江西 株 病毒 由该病毒引起的 江西 株 草鱼出血病每年都给我国草鱼养殖业造成巨大经 广东 株等 不同分离株 济损失严重制约着我国草鱼养殖的健康发展 在基因组序列基因组带型细胞病变对草鱼的致 草鱼出血病病原较为复杂 目前已报道有近 个 病力等方面差异较大 根据现有的分离株基因序 分离株 包括草鱼呼肠孤病毒 株 列信息进行氨基酸和核苷酸序列比对以及构建系 草鱼呼肠孤病毒 株 统进化树分析所有毒株总体上可以分为 大 其中 类 即 个基因型 型代表株为 为草鱼呼肠孤病毒的英文缩写后面的数字或字母 与 型 代 表 株 为 表示不同的株型以下表示方式均与此相同 与 和 型代 表株为 当前全国各地分离到的毒 株中 类亚型均有报道有单独感染也有混合感 越 南 株 湖 南 株 染 通过近年来草鱼出血病病