黄鳍鲷（Sparus latus）两种生长激素受体的cDNA克隆及组织表达分析.pdfVIP

第 42卷 第 6期 海 洋 与 湖 沼 Vb1．42．No．6 2011年 11月 OCEANOLOGIA ET LIMNOLOGIA SINICA NOV．2011 黄鳍鲷(Sparuslatus)]~种生长激素受体的 cDNA克隆及组织表达分析木 马细兰 ，2， 冷婷婷 刘启智 周立斌 张 勇 ① 林浩然 (1．中山大学有害生物控制与资源利用国家重点实验室 生命科学学院 水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物 良种繁育重点实验室 广州 510275；2．华南师范大学生命科学学院 广州 510631； 3．惠州学院生命科学系 生物技术研究所 惠州 516007) 提要 采用RT-PCR方法克隆了黄鳍鲷两种生长激素受体(Growthhormonereceptor，GHR)的cDNA 序列，序列分析表明：GHR1开放 阅读框为 1935bp，共编码645个氨基酸，GHR2开放阅读框为 1749bp， 共编码583个氨基酸，GHRI与GHR2的氨基酸 同源性为36．7％。GHR1和 GHR2在分子结构上存在 显著差异，GHR1胞外域有7个半胱氨酸残基而GHR2只有6个；GHR1胞 内域有 9个酪氨酸残基而 GHR2只有5个，两者的结构差异表 明两者可能具有不 同的生物学功能。用 Rea1．timeRT-PCR方法 研究了GHR1和GHR2在各组织的分布情况，结果表 明：GHR1和 GHR2在所检测的 l0种组织中均 有表达，其中以肝脏、肌 肉、垂体表达量较高，且在大部分组织中GHR2表达量均高于GHR1。 关键词 黄鳍鲷，生长激素受体，cDNA克隆，Rea1．timeRT-PCR，组织表达 中图分类号 O95 生长激素(Growthhormone，GH)是脊椎动物脑垂 因为其GHR基因异常，导致组织中GHR数量显著减 体分泌的单链多肽 ，具有促进生长、加快蛋 白质合 少甚至缺乏所致 (Tanakaetal，1995)。 成、提高食物转化效率、提高广盐性鱼类渗透压调节 国内外学者针对鱼类生长激素的相关 内容做了 能力等作用，是调节动物生长最主要 的内在 因素之 大量研究，而对鱼类生长激素受体 的研究起步较晚， 一 (林浩然，1999)。GH通过与靶细胞膜表面的生长激 现已克隆了黑鲷 canthopagrusschlegelii)(Tseetal， 素受体(Growthhormonereceptor．GHR)结合，启动细 2003)、真鲷 (Sparusaurata)(Calduch-Gineretal， 胞 内的信 号传导机制 ，促进胰 岛素样生长 因子 2003)、 日本鳗鲡 nguillajaponica)(Ozakietal， (Insulin—likegrowthfactor，IGF．I)的表达，再通过血 2006a)等十多种鱼的GHR，并对 GHR 的表达模式进 液循环到达机体的局部组织，促进组织细胞 的生长 行了初步 的研究(Tseetal，2003；Ozakietal，2006b； 和分化 。GH靶组织 中GHR 的多少 、功能的正常与 马细兰等 ，2010)。近年来在真鲷 (Saera—Vilaetal， 否将直接影响到GH生理效应的发挥，例如GH拮抗 2005)、黑鲷 (Jiaoetal，2006)、南方鲶 (Silurusmerid- (Growthhomroneresistance)或 GH 不敏感 (Growth ionalis)(章力等，2006)、尼罗罗非鱼(Oreochromis hormoneinsensitivity，GHIS)的病人 出现生长缓慢，其 niloticus)(马细兰等，2006；Maetal，2007)、斜带石斑 原 因在于它们的 GHR基因发生了变异，导致 GH与 鱼(Epinepheluscoioides)(Lietal，2007)等少数几种鱼