核酸检测技术（NAT）及其在血液筛检中的应用.pdfVIP

维普资讯 中国输血杂志2004年 12月第l7卷第6期 Chi11Bl !塑 !!!19坚! 望! !∑ ．!! ： ● 钚综 述 ● 核酸检测技术(NAT)及其在血液筛检中的应用 王 迅 (上海市血液 中心，上海 200051) 关键词：核酸检测技术；血液筛检；血液安全 中图分类号 ：Q5O3 R373．2 文献标识码：A 文章编号 ：1004—549X(2004)06-0465-04 输血相关传染病 的预防和控制已经成为全社会关注 的 要原理是使用一些物理、化学和生物学方法，通过靶核酸直 焦点，而新技术 的引进是进一步提高血液安全性 的重要一 接扩增或其附带的信号扩增 的方法，让看不见的极微量的核 环 。笔者就病原 体核酸 检测 技术 (nucleicacidtesting， 酸变成直观的光 电或可视信号，从而判断标本 中是否存在相 NAT)及其在血液筛检中的应用情况作一介绍，并对该方法 应的病原体 。NAT敏感性高，可检出标本中极微量 的核酸 ， 在我国推广和应用的必要性和可行性作初步探讨。 ’ 甚至在病毒感染后数天即能检出，大大缩短了 “窗口期 ”。初 步研究表明，NAT可将 HBV、HCV和 HIV感染的平均 “窗 1 NAT及其在血液筛检中的必要性 口期”缩短 25d(缩短 “窗 口期”5O )、59d(89 )和 lld 目前，酶免检测 (EIA)技术已经广泛运用于血液筛检， (50 )[；此外 NAT还可以检 出因上述其它 3种原因而漏 虽然该方法的灵敏度和特异性一直在不断地改进和提高，但 检的被感染献血。如法国应用 NAT，从大约 150万份献血 每年仍有少数新发输血后肝炎病例报道，如美国无偿献血者 中筛检出4份 HCVRNA阳性、抗体阴性的样本，其中1份 每单位供血传播 HBV、HCV和 HIV的危险性分别为 1： 即为免疫静默感染[。尽管 NAT从理论上并不能完全消 66000、1：103000和 1：676000[。这些危险主要来 自：病 除感染 “窗 口期”，但病毒核酸转 阳之前的血液传染性极低 ， 毒感染者。窗121期”献血，病毒变异，免疫静默感染 (immu— 可以有效地预防经输血传播病毒性疾病[g]。因此 ，NAT 的 引入可使输血传播疾病的危险性降到最低[1。 nosilem infection)以及人工操作错误[2]。所谓 “窗 口期”，是 指从感染病原开始，直至用某种检测方法能够检测到该病原 2 NAT的几种方法 存在为止的这一段时间口]。由于感染后病毒颗粒先于抗原、 抗体释放入血 ，如 HCV感染后 ，在长达 1～3个月的时间 1985年具有划时代意义的聚合酶链反应 (polymerase 里，感染者体内没有或仅有微量而无法检测 出的抗体 ，而血 chainreaction，PCR)的发明，标志着 NAT的诞生。随后 ，在 液具有传染性 。因此抗原、抗体检测 的 “窗 口期”较长 ，如 PCR的基础上 ，派生 出许多其它原理 的体外NAT方法，主 HBsAg、抗一HIV检测 的 “窗 121期 ”分别为 56d和 22d，抗一 要分为PCR扩增方法、逆转录依赖的扩增方法及其它NAT HCV检测的 “窗口期”则长达 72d[，故美国9O 以上输血 方法3大类…]。这些技术灵敏度和特异性或高或低，操作 传播 HIV和 HBV以及 75 以上输血传播 HCV的危险性 或简单或复杂，适合在各 自不同的领域运用，它们之间的比 均来 自“窗口期”感染献血嘲。1995～1998年上海市输血后