生物分子标记在林木研究中的应用与现状.pdfVIP

维普资讯 第21卷 第2期 雁 北 师 范 学 院 学 报 Vo1．21．NO．2 20()5年4月 JOURALOFYANBEINOt~IALUNIVERSITY Apr．2005 文章编号：1009—1939(2005)02—0019一O3 生物分子标记在林木研究中的应用与现状 张巧仙 ，范冬梅 (吕梁高等专科学校化学系，山西 离石 033000) 摘 要 ：介绍 了生物分子标记技术的概念及其分类，以及在植物遗传 多样研究、亲缘关系分析 、数量性状 的基 因定位与遗传图谱构建、品种改 良及分子标记辅助育种等研究中的应用与现状，提出了当前分子生物学技术在植 物资源保存、繁殖、利用研究应用中存在的问题及解决途径 关键词 ：生物分子标记 植物种质资源 中图分类号 ：Q789 文献标识码：A 生物分子标记或称遗传标记 ，本质上是指能反 者主要是 以重复序列包括 串联重复序列 (如卫星 映生物个体或种群 问基 因组 中某种差异特征的 DNA、小卫星DNA和微卫星 DNA)和散布重复序 DNA片段．这种DNA片段是由基因组DNA经限制 列 (如转座子、逆转座子)为探针进行分子杂交．第二 性内切酶切割、PCR扩增 、分子杂交后在 电泳胶上 类以电泳技术和PCR技术为核心，其代表性技术有 或杂交膜上检测到的．推动 DNA分子标记技术研 RAPD(Random amplifiedpolymorphism DNA)[， 究迅速发展的动力，一方面是原有技术存在 的缺点 SSR(Simplesequencerepeat，或称 Simplesequence 或应用上 的限制 ，另一方面就是 DNA分子标记技 lengthpolymorphism，SSLP，或称 Sqeuence—tagged 术的广泛应用及其取得的长足进步 植物种质资源 microsatellitesite，STMS)和 AFLP(Amplifiedre— 包括基因资源与为挖掘新品种 、新类型所收集的育 strictionfragmentpolymorphism)t31．第三类 以DNA 种原始材料．近年来，分子生物学技术中DNA指纹 序列分析为核心的分子标记技术，其代表性技术为 图谱的不断发展与完善，把种质资源的研究提高到 ITS(intemaltranscrispacers)测序分析技术 J．当 一 个崭新的水平 ． 然 ，这种区分不是绝对 的，有些分子标记技术是介于 第一、二类 之 间，如 ：微卫 星 DNA(micro~atellite 生物分子标记技术 DNA)既可以作为探针进行分子杂交 以测定 DNA 生物分子标记技术也称 DNA分子诊断技术， 多态性 (如 DNA指纹技术)，也可以作为引物进行 是指由于DNA分子发生缺失、插人、易位、倒位、重 PCR扩增以测定 DNA多态性 (如 SSR技术)．有些 排或由于存在长短与排列不一的重复序列等机制而 分子标记技术是介于第二、三类之间．如：SCARS 产生的多态性标记 ，其检测技术，即分子标记技术． (Sequencecharacterizedarnplifiedregions)是对特异 从 1974年 Grodzicker等创立限制性片段长度多态 RAPD条带进行克隆并测序 ，并 以此测 出序列的末 性 (RFLP)技术以来 ，尤其是在近十年中，DNA分子 端 14nt加上原来 RAPD所用的 10nt的随机引物合