红菜薹温敏型胞质雄性不育相关基因的克隆与表达分析.pdfVIP

第 49卷第 11期 湖 北农 业 科 学 Vo1．49NO．11 2010年 11月 HubeiAgriculturalSciences NOV．，2010 红菜薹温敏型胞质雄性不育相关基因的克隆与 表达分析 邓晓辉，邱正明，聂启军，朱凤娟 (湖北省蔬菜科学研究所 ．武汉 430064) 摘 要：根据 GenBank中o，．厂22 和 atp6基因的保 守序 列设计特异 引物对红 菜薹温敏型 (P01)胞质雄性 不 育系的基 因组 DNA进行特异扩增 ．获得 了红菜薹 P0l胞质雄性不育特畀基 因0 24p和atp6p的DNA 序列 ，红菜薹 oq224v和 p 基 因与 已报道的 0，2 和 atp6基 因的 同源性 高达 1O0％ 运用半定量 RT—PCR对 p6p基因在不 同器官中的表达水平进行 了分析 结果表 明，不育系花期 叶片q-该基 因的表 达量比蕾(长度小于0．5mm)和雄蕊中的明显低 ．在后 2个器官中的表达量无明显差异：而在保持系的上 述3个器官中的表达量无明显差异 该结果显示，mp6p基 因表达上调与孢原细胞分化受阻相关。 关键词 ：红菜薹；胞 质雄性不育；0r，224；atp6；半定量 RT—PCR 中图分类号：Q785：Q786；$634．5 文献标识码 ：A 文章编号：0439—8114(2010)11-2636—04 Cloning and Expression AnalysisofGenesRelated to CytoplasmicMale Sterility in PurpleStem DENG Xiao-hui，QIUZheng-ming，NIE Qi-jan，ZHU Feng-juan (VagetableResearchInstitule，HubeiAcademyofAgriculturalSciences，Wuhan430064，China) Abstract：o~224pandatp6pgeneswereclonedfrom thePolcytoplasmicmalesterilitylineofPurplestem throughPCR techniquebyspecificprimersdesignedonthebasisoforf224andatp6geneinGenBank．Thesequenceshowedthesameto therepofledo~224andatp6genes．Thesenli—QRT～PCRanalysisofatp6f)expressionindifferentorgansrevealedthatthe transcribingofatp geneinbud (0．5mlr1)andantherwashigherthanthatintheleafofthePolCMSline；butthere wasnodiffereneeamongtheleaf．bud(O．5ram)andantherofthemaintainerline．Thisresultsuggestedthattheup—regulat- ed expressionofmp6P genewasrelatedtotheinhibition ofthedifferentiation ofarchesporialcel1． Keywords：purplestem；cytoplasmicmalesterility；o0C224；ap6；semi—QRT—PCR 红菜薹 (Purplestem)是湖北 、湖南和四川等地 和Brassicn凡apn同属于芸苔属 ，因而本研究根据这 的一种特色蔬菜 ．属典型异花授粉作物 ，杂种优势 两个基因的同源序列设计特异引物 ．直接以