纳米金放大法荧光检测乙肝病毒HBV-DNA.pdfVIP

第 33卷 第 1期 青 岛科 技 大 学 学 报 (自然科学版) Vo1．33No．1 2012年 2月 JournalofQingdaoUniversityofScienceandTechnology(Natura1ScienceEdition) Feb．2012 文章编号 ：1672—6987(2012)01—0042—05 纳米金放大法荧光检测 乙肝病毒 HBV-DNA 牛淑妍，娄晓飞 ，渠丽景 (青 岛科技大学 化学与分子工程学院，山东 青 岛 266042) 摘 要 ：利用纳米金放大的方法，将修饰荧光 团的信号 DNA连接在纳米金表面，纳米金 通过 HBV—DNA与磁珠连接 ，1，4一二硫 苏糖醇 (DTT)可以替代信 号DNA连接在纳米金 表面，将荧光素标记 的信号 DNA释放于溶液 中，测定溶液 的荧光强度可 以得 到 HBV— DNA的浓度 。通过条件优化 实验确定 了最佳 实验条件 ：生物素与亲和素最佳结合时间为 25min，DNA 的最佳杂交时间为 15min。测定 HBV—DNA 的线性 范围为 3．0×10-1。～ 1．2×10 mol·L ，线性相关系数 r一 0．9914，检测 限为 2．18×10 mol·L (S／ N 一 3)。 关键词：HBV—DNA；纳米金 ；荧光光谱 中图分类号 ：O 657．32 文献标志码 ：A GoldNanOparticlesAmplificationAssayforFluorescence—detection ofHepatitisB VirusDNA NIUShu—yan，LOUXiao-fei，QULi-jing (CollegeofChemistryandMolecularEngineering，QingdaoUniversityofScienceandTechnology，Qingdao266042，China) Abstract：Using3highlyultrasensitivefluorescence—detectionmethodbasedongoldnan— oparticlesandmagneticbeadsassistedbydithiothreitol(DTT)could detectthetarget DNA．ThedetectionofHBV—DNA wasachievedbymonitoringfluorescencesignalsob— tainedfrom theadsorbed thiolated oligonucleotidesmodified with fluorophorewhich wereliberatedfrom thegoldnanoparticlesurface．Thebestreactionconditionswereob— tainedthroughthestudyontheeffectofdifferentreactiontimeonthesystem ’Sfluores— centintensity．Theoptimalreaction timeofbiotinandstreptavidinwas25min．15min waschosenasthehybridizationtimeofcaptureprobesandtargetDNA．In thesystem offluorescencespectroscopybasedongoldnanoparticles。theHBV—DNA couldbequan— tifiedin therangeof3．0 × 10一。——1．2 × 10一 mol·L一 andthedetectionlimitwas 2．18 × 10 mol·L (S／N一3)． Keywords：HBV—DNA ；goldnanoparticles；fluorescencespectroscopy