长穗偃麦草EeNAC9基因功能初步研究.pdfVIP

生物技 术通报 · 研 究 报 告 · BIoTECHNoLoGY BULLETIN 2011年 第 6期 长穗偃麦草 EeNAC9基因功能初步研究 高世庆 王永波 唐益苗 徐蓓 马锦绣 陈京瑞 柳珊 张风廷 赵 昌平 (北京农林科学院杂交小麦工程技术研究中心，北京 100097；首都师范大学生命科学学院，北京 100048) 摘 要： NAC(NAM—ATAF—CUC)转录因子在植物逆境胁迫应答反应中发挥重要作用。通过同源克隆方法从长穗偃麦 草中分离到一个NAC转录因子基因EeNAC9(ElytrigiaelongateNAM—ATAF—cue9)，该基因编码274个氨基酸，等电点为9．03； 对该蛋 白二级结构预测发现主要存在9个螺旋区(helices)和无规则卷 曲(coils)。氨基酸疏水性分析表明，该蛋 白存在大量的 疏水性氨基酸。将该基因构建到PBI121双元植物表达我体上，通过农杆菌介导转化烟草，经PCR分子检测获得 11D代 35S：： EeNAC9转基因烟草阳性植株65株。胁迫培养基上初步功能研究表明，过表达 EcNAC9转基因烟草表现出对ABA的敏感性， 同时增强了对干旱、高盐的胁迫耐性，从而为小麦抗逆分子育种提供 了优 良候选基 因资源。 关键词 ： NAC转录因子 转基 因烟草 ABA敏感性 盐胁迫 干旱胁迫 PreliminaryFunctionResearch ofEeNAC9Genefrom elytrigia elongata GaoShiqing WangYongb0 TangYimiao XuBei， MaJinxiu ChenJingrui LiuShah ‘ZhangFengting ZhaoChangping (BeijingEngineeringandTechniqueResearchCenterofHybridWheat，BeltingAcademyofAgriculturaland ForestryScience，Beijing100097；2CollegeD厂LfieScience，CapitalNormalUniversity，Beijing100048) Abstract： NAC(NAM—AIF—CUC)transcriptionfactorsplayimportantrolesinvariousstressresponses．Inthisstudy。oneNAC genenamedEeNAC9encodingaNAC proteinfrom Elytrigiaelongatewasisolated．TheputativeEeNAC9proteinwascomposedof274 aminoacids，andanisoelectricpointwas9．03．Proteinsecondarystructureshowedthisproteinhad9helicesandothercoils．Hydropho— bicityanalysisofaminoacidsdisplayedthattheproteincontainedalotofhydrophobicaminoacids．Then，EeNAC9genewasconstructed intoPBI121byconnectionandtransferredintotobaccosbyAgrobacterium—mediatedmethods．65TOtransgenicpo sitiveplantswereob— tainedbyPCRmoleculartests．PreliminaryfunctionidentificationshowedthatoverexpressionofEeNAC9 genehadaneffectonABA sensitivityandenhanceddroughtandsalttoleranc