沙门氏菌rDNAISR序列测定及特征分析.pdfVIP

( ) 　 中山大学学报 自然科学版 　 　第 38 卷 　第 1 期 ACTA 　SCIENTIARUM 　NATURALIUM Vol38 　No 1 　 1999 年 　1 月 UNIVERSITATIS 　SUNYATSENI Jan 　1999 文章编号 : ( 1999) 沙门氏菌 rDNA ISR 序列测定及特征分析 周　惠 , 杜延平 , 屈良鹄 ( 中山大学生物工程研究中心 , 广州 510275) 摘 　要 : 以细菌rDNA ISR 通用引物对鼠伤寒等 8 种沙门氏菌进行了 PCR 分析 , 表明在沙门 氏菌属的不同菌株中都存在 1 个比大肠杆菌的 LISR 长几十个碱基对的 LISR. 进一步测定和 分析鼠伤寒、纽波特和田纳西 3 种沙门氏菌LISR 的全序列 , 揭示出不同血清型的沙门氏菌具 有相似的 tRNA 基因间隔区和特征性核苷酸序列. 这些特征序列可以作为沙门氏菌属的分子标 志 , 用于沙门氏菌的分子检验和系统学鉴定. 关键词 : 沙门氏菌 , rDNA , 核苷酸序列 , ISR 分类号 : Q 751 　　文献标识码 : A 沙门氏菌是引起食物中毒的常见病原菌. 沙门氏菌属 ( Salmonella) 的菌种繁多 , 迄 今已发现 2 000 余种. 对沙门氏菌的分类和鉴定主要是根据沙门氏菌的形态、生理和生化 特征以及血清反应来检验定型. 在不同的培养条件下沙门氏菌的形态和抗原结构有可能发 生变异 , 如由于菌鞭毛的脱落而失去某些抗原. 同时 , 常规的沙门氏菌检验方法过程复 杂 , 并存在与其他相近细菌发生交叉反应的可能性 , 从而影响对沙门氏菌的鉴别. 采用分子生物学方法对沙门氏菌基因序列进行分析 , 为沙门氏菌的分类和鉴定提供了 ( ) 新的手段. 大分子 rRNA 及其基因 rDNA 是研究细菌系统学的一个通用的分子指标 , 同 时也是细菌鉴别的良好目标基因[1 ] . 目前, 国际上已开展对各类沙门氏菌 16S rRNA 序列 的比较分析 , 并在以 16S rRNA 序列为基础的 rDNA 探针方面取得进展[2 ] . 但是 , 由于细菌 16S rRNA 十分保守 , 可供选择的沙门氏菌专一性序列不多. 因此 , 目前研究的重点已移 向rDNA 16S - 23S 基因间隔区 ( ISR) . 对肠炎沙门氏菌 ( S enteritidis) 大小 2 种 rDNA ISR 的序列测定和分析 , 发现在 2 个 tRNA 基因之间存在 1 个高变区 ; 并提出该区有可能包含 沙门氏菌的特征序列[3 ] . 为了验证这一推测 , 进一步揭示沙门氏菌属的分子特征 , 对 3 种 分属不同抗原组的常见沙门氏菌 rDNA ISR 区进行了序列测定和分析. 1 　材料与方法 11 　沙门氏菌株 鼠伤寒沙门氏菌 S typhimurium , 纽波特沙门氏菌 S newport , 田纳西沙门氏菌 ( )