微量热法研究金银花中绿原酸的拟菌性能.pdfVIP

维普资讯 2008年 3月 山东 师 范 大 学 学 报 (自然 科 学 版) Mar．2008 第23卷 第 1期 JoumalofShandongNormalUniversity(NaturalScience) V01．23No．1 微量热法研究金银花中绿原酸的拟茵性能 康戈莉 尚树川 胡婉莹 (1)淄博职业学院化学工程学系，255013，山东淄博； 2)山东师范大学科研处，25(1014，济南∥第一作者52岁，女，教授 ) 摘要 从金银花中提取其有效成分绿原酸，用热活性检测仪测定了不同浓度的绿原酸中大肠杆菌生长代谢的热功率一时间 曲线，由Logistic方程计算绿原酸的最佳拟菌浓度 ． 关键词 微量热法；绿原酸；大肠杆菌；拟菌作用；热谱曲线 中图分类号 O642．3 近年来，金银花为主要原料的药品具有抗病毒、消炎等疗效 ，被广泛应用于医药市场和临床医疗．我们从金银花中提取出 了有效成分绿原酸，用大肠杆菌做拟菌实验．这是依据细菌细胞内的各种代谢过程，都伴随着能量的转移和变化，用微量热法 可连续测量细菌代谢过程所产生的热量 ，得到整个代谢过程的热活性信息 J．微生物代谢热谱曲线代表着细菌代谢的特征， 反映了代谢过程中生理生化特征变化的情况．本文采用微量热法研究了金银花中有效成分绿原酸对大肠杆菌的拟菌特性 ，用 热活性检测仪测出不同浓度绿原酸下大肠杆菌生长代谢的热功率一时问曲线，得到了该试验条件下的最佳拟菌浓度 ． 1 微量量热法对细菌的研究 1．1 概 况 细菌生长的热动力学研究是物理化学研究的前沿课题_2]，它用微量热法和热动力学原理来研究细菌的耐药 性．目前细菌和病毒的种类繁多，而且繁殖速度极快，一些细菌和病毒几乎能在任何药物的攻击下存活下来，就会把抗药基因 遗传给后代，随着时间的推移，就会形成具有完全抗药性的细菌 ．不同细菌的代谢都有 自己的特性，同种细菌的代谢和试验条 件密切有关，如温度、浓度等实验条件的改变必然导致代谢过程的改变．某种药物浓度大或小都不一定最有效，何种浓度为最 适宜的拟菌浓度，具有足够灵敏度的微量热计可直接测量细菌的代谢活性 ，比较准确地提供耐药性的参数．通过细菌对 中药 耐药性的测定 ，筛选药物，指导用药． 1．2 原 理 用热活性检测仪测定在此条件下，中药提取物绿原酸对大肠杆菌生长代谢过程的热功率——时间曲线，构建 细菌生长模型，计算出生长速率常数 ，并确定生长速率常数与药物抑菌浓度的定量关系：细菌生长模型． 非限制条件下细菌生长的动力学模型 N = e lnNt=In +忽 (1) 数据处理用 Origin软件中logisticmodel， 方程形式为 Y=A+B*X (2) 生长速率常数 Y=0时，x为最小拟菌浓度，或最佳抑菌浓度 (blIC)． 2 实验部分 2．1 实验仪器 使用瑞典ThemudMetricAB公司制造的八通道微量热活性检测仪 (3114／3236TAMAir)]．该仪器是用空气来控 制体系温度 ，并拥有 8个通道．其主要包括测量系统、控温系统、数据输出系统．仪器是一种灵敏度较高的热导式量热仪，主要 用于研究温度变化在 5～60℃之间的反应体系，可以连续监测生物学、生物化学、化学、冶金、材料学中发生的慢反应和慢过 程．其主要的检测原理为：根据热流原理，使样品因物理变化或化学反应所产生的热迅速地流向维持在恒温的环境．每一个通 道包括两个测量筒 (A为样品，B为参比)，其中有两个赛贝克热传感器，一个在样品筒下面，一个在参比筒下面．样品和它的环 境之间温差引起的热交换主要通过热流传感器，相应地在该传感器中形成一个正比于热流速度的电势信号．参比中装有与样 品热容相同的物质，两者实行孪生式对接 ，这样就消除了因外界温度波动产生的背景噪音．八通道微量热活性检测仪可输出 1×10 W的功率，2