MBL与Raji细胞结合特性的研究.pdfVIP

Pa。pers …一。一…。一一7÷z一一。，。。。…t……，mz·。-*。*～～一．一；，o…*。一m…*zt…m一一R，esearch 13 PI13豢翳第‰…幻s Ⅵr、Vw．pibb．ac．Cll MBL与Raji细胞结合特性的研究· 王明永”张雅妮张丽芸卢 晓雷鸣 李瑞芳 陈政良… (南方医科大学免疫学教研室，广州5105 x5) 摘要甘露聚糖结合凝集素(MBL)作为关键的天然免疫模式识别分子已得到共识，但其在获得性免疫应答中是否发挥作用目 抑制作用，且呈剂量依赖关系．提示MBL作为一种重要的模式识别分子，不仅发挥天然免疫功能，而且可能在调节获得性 免疫应答中起一定作用． 关键词甘露聚糖结合凝集素，Raji细胞，B淋巴细胞，受体 学科分类号R392 lectin， 甘露聚糖结合凝集素(mannan．binding状细胞(dendriticcell，DC)t6a，影响单核细胞细胞因 MBL)是由肝细胞合成并分泌的血浆蛋白，为C型子的表达阴．提示MBL在免疫调节中发挥重要作 用，并极有可能参与获得性免疫应答．但遗憾的 凝集素超级家族中胶凝素(collectins)家族成员【l】． 成熟MBL肽链自N端至C端依次有4个结构域：是，迄今尚未发现MBL介导获得性免疫应答的直 富含Cys的N端区、胶原样区(collagen—likeregion，接证据． CLR)、颈区和糖识别域(carbohydrate．recognition本实验中，我们选择人B淋巴系Raji细胞作 为对象，研究MBL是否与其结合及其结合特性， domain，CRD)．完整MBL分子是同质三肽链结构 单位的寡聚体，多至六聚体，只有高寡聚体MBL 并对这种相互作用的效应进行了简单分析，为探索 分子才具有生物学活性．CRD是MBL分子的识别MBL直接参与获得性免疫应答提供初步的依据． 功能区，能选择性识别多种病原体表面的糖结构， 1材料与方法 而CLR是其效应功能区，MBL激活补体和结合胶 凝素受体的功能定位于此区．MBL分子通过其 1．1主要材料 associated CLR与MBL相关丝氨酸蛋白酶(MBL serine 细胞株由Dr．Han(Scripps，LaJolla，CA)惠赠．人 proteases，MASPl、MASP2)结合形成复合 redblood 体，在其CRD识别、结合病原微生物的糖结构后， 红细胞(human cell，HRBC)用密度梯度离 活化MASPs酶原，继之激活补体凝集素途径而发心法分离于新鲜外周血(本室志愿者提供)．纯化的 挥溶破和间接调理功能，并能与吞噬细胞胶凝素受 人天然MBL，按照本室常规方法isl分离纯化并鉴 定．抗人ClqR单克隆抗体(monoclonal 体(即ClqR)结合而启动调理吞噬，还可介导MBL antibody， 依赖的细胞介导的细胞毒作用仁3】． ’广东省自然科学基金研究团队项目(015003)． 最近研究发现，作为两种关键的天然免疫分子