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维普资讯
园 艺 学 报 2007，34 (1)：125—130
ActaHorticulturaeSinica
RNAi沉默 BcMF3基 因对菜薹花粉发育的影响
刘乐承 ，向 殉 ，曹家树h
(浙江大学蔬菜研究所，杭州 310029； 长江大学园艺园林学院，湖北荆州 434025)
摘 要：根据从白菜 (Brassicacampestrisssp．chinensisvaf．communis)核雄性不育两用系中分离到编码
果胶甲酯酶 (PME)的雄性不育相关基因BcMF3cDNA序列设计引物，从白菜花蕾eDNA中扩增出一短一
长两个片段，分别反向和正向连接至双元载体 pBI121中，得到了RNAi(RNAinterference)植物表达载体
pBI-B3R，并导入农杆菌 LBA4404菌株中；通过组织培养途径转化菜薹 (B．campestrisssp．chinensisvat．
parachinensis)，分子检测证明BcMF3片段单拷贝整合到转基因菜薹的基因组中；50％转基因菜薹植株的花
粉畸形，花粉离体萌发率为32．3％，出现畸形花粉植株的花药PME活性降低了 13．5％。这一结果从转基
因植株后代的表型和酶活性上证明，采用 RNAi技术沉默BcMF3基因，可能通过影响PME活性而引起转基
因菜薹植株部分花粉的败育，从而证明BcMF3基因在普通白菜和菜薹等植物的花粉发育中起着重要作用。
关键词：白菜；菜薹；花粉
中图分类号：S634．5 文献标识码 ：A 文章编号：0513-353X (2007)01-0125-06
EffectsofSilencingBcMF3 by RNAion Pollen DevelopmentofFlowering
ChineseCabbage
LIU Le．cheng ，XIANG Xun ，andCAOJia．shu
(lmttiuteofVegetableScience，Zhejiang University，Hangzhou310029，China；ColelgeofHorticultureandGardening．Yangtze
University，Jingzhou，Hubei434025，China)
Abstract：Inanefforttostudythemolecularmechanism ofgeniemalesterilityinplants，BcMF3gene
thatencodesapectinmethylesterase(PME)wasisolatedfromhtefertileBlineofChinesecabbage．oak．choi
(Brassicacampestrisssp．chinensisVra．communis，syn．B．rapassp．chinensisvar．communis)previously．
Int}Iepresentpaper，primersweredesignedbasedonhteeDNA sequenceofBcMF3． anda458bpfragment
na da538bpframg entwereamplifiedfrom thecDNA offlowerbudsofChinesecabbage．pak．choi Thesetwo
．
fragmentswereintroducedintobinaryvectorpBI121inantisenseorientationnadsenseorientationrespectively
。
nadthegeneratedRNAinterference(R
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