新乡医学院酶工程考试综合.docVIP

中新课本中的知识 绪 论 酶是具有生物催化功能的生物大分子。是生物催化剂(Biological Catalyst)。酶催化是生物体的一切生命活动的基础，是生物反应的核心。 生物催化（Biocatalysis)利用酶或有机体（细胞或细胞器作为催化剂实现化学转化的过程。 酶工程又称酶反应技术，就是将酶、细胞或细胞器等置于特定的生物反应装置中，利用酶具有的生物催化功能，借助工程学手段将相应的原料转化成有用的物质并应用于社会生活的一门科学技术。 第二章 一、名词解释： 1、酶工程：酶反应技术，就是将酶、细胞或细胞器等置于特定的生物反应装置中，利用酶具有的生物催化功能，借助工程学手段将相应的原料转化成有用的物质并应用于社会生活的一门科学技术。酶催化的特点是什么？ 高效率高度专一性反应条件温和活性的可调控性活性的不稳定性 影响酶催化的因素有哪些？ 底物浓度产物浓度酶浓度温度pH6抑制剂激活剂 米氏方程的意义是什么？ Km酶促反应速度为最大速度一半时的底物浓度。 Km可表示酶与底物的亲和力 Km是酶催化特定反应的特征性常数。可确定最适底物 Vm是酶完全被底物饱和时的反应速度 颗粒在离心过程中的离心力是相对颗粒本身所受的重力而言，因此把这种离心力叫做相对离心力。颗粒物质或溶质在超速离心场中的沉降速率，用小写斜体s表示。s=v/a，其中a为重力加速度或离心加速度，v为沉降速度，即沉降系数为每单位离心力场的沉降速度。大分子和颗粒的沉降系数常用斯韦德贝里单位表示 ．差速离心 （differential centrifugation） 采用不同的离心速度和离心时间，使沉降速度不同的颗粒分批分离的方法。 特点：用于分离大小和密度差异较大的颗粒 密度梯度离心 （density gradient centrifugation） 样品在密度梯度介质中进行离心，使沉降系数比较接近的组分得以分离的一种区带分离方法。 常用的密度梯度溶液是蔗糖溶液特点：区带内的液相介质密度小于样品物质 颗粒的密度。适宜分离密度相近而大小不同的固相物质。 等密度梯度离心又称沉降平衡离心 （sedimentation equilibrium centrifugation）。 根据颗粒的密度不同而进行分离。 离心时，在离心介质的密度梯度范围内，不同密度的物质颗粒或向下沉降，或向上漂浮，达到与其相同的密度时不再移动，形成区带。 常氯化铯（CsCl）作为梯度介质。特点： 介质的密度梯度范围包括所有待分离物质的密度。 适于分离沉降系数相近，但密度不同的物质。 纳 滤 气体分离 海水淡化 超纯水/白蛋白浓缩 前处理/终端过滤 医药/啤酒 气体/蒸汽分离 电位差 电渗析 海水淡化/废水 浓度差 浓度差 浓度差（分压差） 浓度差＋化学反应 渗析 控制释放 渗透蒸发 液膜 人工肾 医用/农药 无水乙醇 金属分离/废水 A加压膜分离 B电场膜分离C扩散膜分离 加压膜分离a利用超滤膜在一定压力下使溶液中大分子滞留，而小分子及溶剂滤过的方法。超滤法在蛋白质溶液除盐、浓缩及分离纯化中有广泛的应用。 b在高浓度水溶液一侧加压，使高浓度水溶液侧与低浓度水溶液侧的压差大于渗透压，则高浓度水溶液中的水将通过半透膜流向低浓度水溶液侧，这一过程就称为反渗透（海水淡化）c一种静压差过滤，利用筛网状过滤介质膜的“筛分”作用进行分离的膜过程。实施微孔过滤的膜称为微孔膜。 （2）电渗析：在半透膜的两侧分别装上正、负电极。（2）离子交换膜电渗析：用离子交换膜代替一般的半透膜。 应用：脱盐，海水淡化，纯水制备，从发酵液中分离柠檬酸、谷氨酸及凝胶电洗脱 （3）扩散膜分离即透析，溶质分子Y 从高浓度一侧通过膜向低浓度一侧移动 7比较吸附层析、疏水层析、离子交换层析、凝胶过滤、亲和层析 在原理、层析介质、操 作及应用方面的异同点。 吸附层析是利用吸附剂对不同物质的吸附力不同而使混合物中各组分分离的方法。吸附层析是各种层析技术中应用最早的技术。 （分配层析是利用各组分在两相中的分配系数不同，而使各组分分离的方法。 分配系数是指一种溶质在两种互不相溶的溶剂中溶解达到平衡时，该溶质在两项溶剂中的浓度的比值。在层析条件确定后，层析系数是一常数。）中 离子交换层析是利用离子交换剂上的可解离基团（活性基团）对各种离子的亲和力不同而达到分离目的的一种层析分离方法。 9比较连续与非连续、变性与非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳区别。 PAGE根据其有无浓缩效应，分为： 连续电泳（continuous electrophoresis）采用相同孔径的凝胶和相同的缓冲系统 不连续电泳（discontinuous electrophoresis） 采用不同孔径的凝胶和不同缓冲体系 非变性凝胶里面没加变性剂，一