亲和毛细管电泳间接紫外检测法测定金属络合物的亲和常数.pdfVIP

亲和毛细管电泳间接紫外检测法测定金属络合物的亲和常数 夏之宁1，刘 勇1，张小川2，屈鹏程2 1（重庆大学环境与化学化工学院，重庆400044; 2中国石油西南油气田分公司重庆气矿地质研究所，重庆400021） 摘要：采用亲和毛细管电泳间接紫外检测方法，根据“峰漂移”模型，通过迁移时间的测定，可以获得在水体系中有 极低亲和常数的金属络合物的亲和常数。将该方法分别应用于镁离子-柠檬酸体系和锰离子-酒石酸体系，在pH 为5.01,运行电压为20kV.缓冲溶液组成为咪唑和醋酸的条件下，测定了缓冲溶液中加入不同浓度配体后金属离 子迁移时间的变化，经过数据处理后得出它们的亲和常数对数值分别是3.27和2.28，与文献值较为一致。该方法 适用于结合比为1:1的金属络合物的亲和常数的测定。 关键词：亲和毛细管电泳；间接紫外检测；亲和常数；镁离子；锰离子；柠檬酸；酒石酸 中图分类号：658 文献标识码,A 文章编号：1000-8713(2001)03-0219-03 酸、咪唑、氯化钾、硫酸镁、硫酸锰、柠檬酸、酒石酸均 1 前言 为分析纯，水为二次去离子水。 金属元素的生物活性毒（性）与该元素的存在形 2.2 实验方法及条件 态密切相关，通过测定金属离子与环境配体的亲和 毛细管柱在使用前用0.1mo1/LNaOH冲洗2 常数，可以为评价金属的生物活性 毒（性）提供一个 min，再依次用去离子水和背景电解质 （电解质组 理论依据。很多方法可用于测定亲和常数K络（合 成:5mmolL咪唑，用HAc将pH值调为5.01）各 物稳定常数），如电化学法、分光光度法、萃取法、离 冲洗3min。进样压力5kPa，进样时间4s。采用 子交换法等[1]。这些方法都适用于K值比较大的 UV-240nm间接检测，参比波长为210nm。操作电 络合物，对于K值小的络合物，如元素的易变形态， 压20kV，柱箱温度35℃。每个样品连续运行3 其测试效果不理想。亲和毛细管电泳a（ffinitycapil- 次，取其迁移时间的平均值。保证每次实验的操作 laryelectrophoresis,简称ACE）由于不存在色谱分析 条件完全相同，且每进样一次后都更换缓冲溶液，以 中分离组分与固定相间的作用，能最大程度地保持 确保所测迁移时间的准确性。 体系中各组分的形态和浓度不变，而且具有样品用 2.3间接紫外检测条件的选择 量少、测定速度快、准确性好等优点[2]，因此得到越 由于实验所选的金属离子和配体都没有紫外吸 收，所以采用间接紫外检测法。实验选择咪唑作为 来越广泛的应用。目前，已有采用亲和毛细管电泳 间接试剂，是因为它与被测离子有比较相似的电泳 直接紫外检测法测定金属络合物稳定常数的报 淌度，在240mn 下有较强的紫外吸收，且不会对研 道[。但对于无紫外吸收的配体，直接紫外法不适 究体系产生明显的影响。为了扣除电渗流的影响． 用。针对这一问题，本文采用亲和毛细管电泳间接 需选择一种标识物。钾离子不与所选配体作用，也 紫外检测方法，并且将 “峰漂移”模型][发展一步， 不与缓冲溶液中的咪唑等其他成分反应，在毛细管 不再用配体的总浓度来代替其在溶液中的游离浓 内能保持相对的稳定性，因此选择钾离子作为标识 度，而是通过计算精确求解配体在溶液中的游离浓 物。实验中虽然没有直接测出电渗流，但通过数据 度，求出了镁离子-柠檬酸体系和锰离子-酒石酸体 处理可以扣除电渗流的影响。 系的亲和常数，得到了与文献值较