细胞生物学基础第六章.pptVIP

第三节 核仁 1.纤维中心 在电镜下，纤维中心（fibrillar centers,FC）是被致密的纤维成分不同程度的包围着的一个或几个浅染的低电子密度区域。 2.致密纤维组分(dense fibrillar comoponent,DFC) 电镜下的致密纤维组分是核仁超微结构中电子密度最高的区域，由致密纤维组成，染色深，成环形或半月形包围FC，一般见不到颗粒。实验表明，DFC是rDNA合成rRNA并进行加工的区域，此外还发现该区存在特异性的结合蛋白。 3.颗粒组分(granular component,GC) 颗粒组分由电子密度较高的核糖核蛋白颗粒组成，这些颗粒是正在加工、成熟的核糖体亚单位前体颗粒。在代谢活跃的细胞核仁中，颗粒组分是核仁的主要结构。 通常认为，纤维中心是rRNA基因的储存位点，转录主要发生在纤维中心与致密纤维组分的交界处，rRNA前体的加工在致密纤维组分中进行，某些加工程序也发生在颗粒组分中，颗粒组分是核蛋白体亚单位成熟和储存位点。但现在关于rRNA基因转录的确切位点仍有不同看法。 第三节 核仁 二、核仁的功能 核仁是进行rRNA的合成、加工和核蛋白体亚单位装配的主要场所。 1.rRNA基因的转录 染色体原位分子杂交实验表明，rRNA基因(rDNA)定位于染色体的核仁组织区。真核生物核糖体含有四种rRNA，即5.8s rRNA、18s rRNA、28s rRNA和5s rRNA，其中前三种的基因组成一个转录单位，存在于核仁组织区。若核仁组织区缺失，则不能合成rRNA和形成核糖体（图6-21）。 第三节 核仁 图6-21 rRNA的转录 第三节 核仁 2.rRNA前体的加工 每个rRNA基因转录单位在RNA聚合酶Ⅰ的作用下转录产生原初转录产物rRNA前体，但是不同生物的rRNA前体在大小上是不同的。真核生物的rRNA加工过程比较缓慢，以哺乳动物为例， rRNA前体45S约在几分钟内合成，并在核仁中迅速甲基化（实验表明，rRNA前体的甲基化基团在加工过程中是必需的）；45S RNA 15分钟后分裂成小片段如41S、32S和20S等中间产物，20S很快裂解为18S rRNA,被快速释放到细胞质中；32S保留在核仁颗粒组分中并被剪切为28S和5.8S rRNA。 由此可见，rRNA前体的加工成熟过程也是它们在核仁中的区域性转移过程。即前体从rDNA上被转录后首先出现在致密纤维组分，加工剪切后的中间产物相继出现在颗粒组分上。 第三节 核仁 3.核糖体亚单位的装配 45S rRNA前体被转录后很快与蛋白质结合，因此在细胞内 rRNA前体的加工成熟过程不是以游离rRNA而是以核蛋白的方式进行的。实验表明，45S rRNA前体首先与进入核仁的蛋白质结合形成80S的核糖核蛋白颗粒（RNP）；在加工过程中，80S的核糖核蛋白颗粒逐渐失去一些RNA和蛋白质，剪切形成两种大小不同的核糖体亚单位前体；最后在核仁中形成大、小亚单位被输送到细胞质中。通过放射性脉冲标记和失踪实验观察到，首先成熟的核糖体小亚单位（含18S rRNA）在核仁产生并出现在细胞质中，而核糖体大亚单位的装配时间长，完成较晚。所以在核仁中含有较多的未完全成熟的核糖体大亚单位，而那些加工下来的蛋白质和小的RNA分子仍留在核仁中，可能起着催化核糖体构建的作用（图6-23）。 第三节 核仁 图6-23 核糖体亚单位的装配 第四节 核基质 一、核基质的形态 真核细胞的核内除了染色质、核膜、核仁以外，还有一个以蛋白质成分为主的网络状结构体系。这种网络状结构最早从大鼠肝细胞核中分离出来，并命名为核基质。用核酸酶与高盐溶液对细胞核进行处理，将染色质抽提后，发现核内仍残留有纤维蛋白，称之为核基质。由于其形态与胞质骨架很相似，又称核骨架。 二、化学组成 核基质的组分大致如下：(1)非组蛋白性的纤维蛋白。其中相当一部分是含硫蛋白；(2)少量RNA。在核基质结构之间起着联结和维系作用，是保持核基质的三维结构必需的；(3)少量DNA。这可能是染色质结构中残余部分；（4）部分磷脂和碳水化合物。 第四节 核基质 三、核基质的功能 1.核基质与转录 RNA的转录同样需要DNA锚定在核骨架上才能进行，核骨架上有RNA聚合酶的结合位点，使之固定于核骨架上，RNA的合成是在核骨架上进行的。新合成的RNA也结合在核骨架上，并在这里进行加工和修饰。 2.核基质与DNA合成