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角膜内皮细胞体外培养的研究 中文摘要 角膜内皮细胞形态学上的完整和功能上的健全是临床上评价角膜功能的指 标，也是角膜保存质量评定的标准。观察药物及一些因素对角膜内皮细胞活性的 影响离不开角膜内皮细胞的体外试验，而体外试验的成功也依赖于良好的角膜内 皮细胞培养。角膜内皮盲是角膜病的一种常见病，角膜内皮细胞的体外培养对于 角膜生物学、病理学、药理学以及角膜移植的研究具有重要的意义，也是体外构 建组织工程化人工角膜的重要研究内容之一。 本论文通过对角膜内皮细胞体外原代培养和传代培养的方法进行筛选和优 化，确定角膜内皮细胞原代培养的方法; 揭膜培养法:角膜缘内1mm揭取角膜内皮细胞层，贴于瓶底，使其贴壁生长， 可以获得六角形单层内皮细胞。不使用Trypsin,避免酶对内皮细胞的损伤.不 需较多材料。 消化培养法:材料较多时，采用消化培养法，培养中需控制Trypsin的消化 时间和浓度;接种细胞易贴壁。 组织块培养法:角膜材料较少，采用组织贴片培养法，方法简便易行，细胞 迁出和生长速度较快，避免了Trypsin对细胞的损伤，细胞生长形态正常. 通过研究，确定了角膜内皮细胞最适培养液为DMEM/F12(1:1)