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江西农业大学学报 20 11，33 (5):0987 － 0992 http :/ / xuebao． jxau． edu． cn
Acta Agriculturae Universitatis Jiangxiensis E － mail :ndxb7775@ sina． com
粘质沙雷氏菌中乙偶姻合成途径
、
基因克隆 序列分析及表达
1 2 2 * 2 *
， ， ，
张燎原 孙建安 魏东芝 沈亚领
(1． ， 350002 ;2 ．
福建农林大学 生物农药与化学生物学教育部重点实验室 福建 福州 华东理工大学 鲁华生物技术
， 200237)
研究所 上海
: PCR ， － (
摘要 运用生物信息学和 方法 鉴定了粘质沙雷氏菌乙偶姻生物合成途径中编码α 乙酰乳酸脱羧酶 α
－ ALDC) － ( － ALS) (aceA aceB ) 。 aceA aceB
和α 乙酰乳酸合成酶 α 的基因 和 序列 经测序和序列分析显示 和
(ORF) 780 bp 1 686 bp ， 259 561 ，
基因的开放阅读框 长度为 和 编码 和 个氨基酸 编码蛋白分子量和等电点分别
28． 96 kD 5 ． 48 ，60 ． 70 kD 5 ． 88 ， 。 pET28a (+ ) ，
为 和 和 属酸性蛋白 将两基因分别克隆至 表达载体中 并转化
E． coli BL21 (DE3) IPTG ，SDS － PAGE 29 kD 60 kD
进行 诱导表达 结果表明在大约 和 的位置出现特异性蛋白
， aceA aceB E． coli BL21 (DE3) 。
条带 表明 和 基因在 中获得了高效的表达
: ; ; ; ;
关键词 粘质沙雷氏菌 乙偶姻 克隆 序列分析 表达
中图分类号:Q785 ;Q786 文献标志码:A 文章编号:1000 － 2286 (2011)05 － 0987 － 06
Cloning ，Sequence Analysis and Heterogenous Expression of the
Genes Involved in Acetoin Pathway from Serratia marcescens H30
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