柱前衍生化 HPLC-UV 测定牛膝中齐墩果酸的含量.pdfVIP

柱前衍生化 HPLC-UV 测定牛膝中齐墩果酸的含量 孙晋鹏 a,b a,b a,b* b a,b b ，张军 ，秦雪梅 ，周玉枝 ，张丽增 ，郭小青 ( 山西大学，a.化学化工学院；b.化学生物学与分子工程教 育部重点实验室中医药现代研究中心，太原 030006) 摘要：目的 建立牛膝中齐墩果酸的柱前衍生化高效液相色谱测定法。方法 以对硝基苯甲酰氯为衍生化试剂，对齐墩 果酸分子中的羟基进行苯甲酰化，以乙腈-0.2%磷酸水溶液(95 ∶5)为流动相，在 254 nm 波长处检测。结果 齐墩果酸衍 生化产物线性回归方程为：Y= 85 197X +22 550(r= 0.999 8) ，表明齐墩果酸衍生产物在 2.0~6.0 μg 内线性关系良好。结论 所建立的柱前衍生化 HPLC-UV 可用于牛膝中齐墩果酸的含量测定，齐墩果酸与对硝基苯甲酰氯反应，衍生物为对硝基 苯甲酸齐墩果酸酯，紫外检测波长由 210 nm 红移至 254 nm ，与以往方法比较，大幅改善了测定效果，提高了检测灵敏 度。该方法准确，灵敏度高，为牛膝药材的质量评价提供了参考依据。 关键词：牛膝；齐墩果酸；柱前衍生化；高效液相色谱法 中图分类号：R917.101 文献标志码：B 文章编号：1007-7693(2010)01-0049-05 A Pre-Column Derivatization HPLC-UV Method for the Determination of Oleanolic Acid in Achyranthes bidentata Bl. SUN Jinpenga, b a, b a, b* b a, b b , ZHANG Jun , QIN Xuemei , ZHOU Yuzhi , ZHANG Lizeng , GUO Xiaoqin (Shanxi University, a.School of Chemistry and Chemical Engineering; b.Modern Research Center for Traditional Chinese Medicine, Key Laboratory of Chemical Biology and Molecular Engineering of Ministry of Education, Taiyuan 030006, China) ABSTRACT: OBJECTIVE To develope a pre-column derivatization HPLC method for the determination of the content of oleanolic acid in Achyranthes bidentata Bl. METHODS The hydroxyl of oleanolic acid molecules was benzoylated by paranitrobenzoyl chloride as derivatizing reagent. The eluent consisted of acetonitrile-0.2% phosphoric acid solution (95 ∶5), and the detected wavelength was 254 nm. RESULTS The linear regression equation of derivatives of oleanolic acid was Y=85 197X +22 550 (r=0.999 8), the content of derivatives of oleanolic acid showed a good linearity w