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δ-氨基乙酰丙酸的生物法制备 张 龙 涛 2010-7-7 立题内容 δ-氨基乙酰丙酸（δ-aminolevulinic acid，ALA），又名5-氨基乙酰丙酸，δ-氨基戊酮酸，分子量131.2 ALA是生物合成四氢吡咯的重要前体，是生物合成叶绿素、血红素、细胞色素、微生物B12的必要物质 近年来，ALA作为一种新型的光动力化合物日益受到关注，并已在农业、医学等领域开始发挥重要作用 ALA功能及应用现状 ALA在农业、医学和生物技术中的应用 ALA杀癌及杀草机理 ALA自然界合成途径 生物法合成途径？ 铁代谢调控途径？ ALA合成研究进展-化学法 以乙酰丙酸及其衍生物为原料 以琥珀酸为原料 ALA合成研究进展-化学法 以马尿酸为原料 以吡啶的衍生物为原料 缺点：副产物繁多、污染严重、原料稀缺等 ALA合成研究进展-生物法 研究内容和目标 细菌筛选 已 完 成 目标：探索进行ALA生物法批量制备 基因克隆表达 酶分离纯化 发酵工艺优化 生物制备 工作基础：生产菌株的分离、筛选 光照厌氧富集培养 好氧黑暗培养 摇瓶发酵培养 挑取单菌落 挑取单菌落 离心 上清 TLC定性检测 HPLC定性 鱼塘淤泥样品 将进行工作：发酵工艺优化 培养基优化 摇瓶发酵工艺优化 上罐发酵优化 将进行工作：酶分离、纯化 (NH4)2SO4 硫酸铵沉淀 透析 发酵培养 细胞破碎 离心 溶解沉淀 上清 蛋白纯化系统 将进行工作：基因克隆、表达 测序 Amp 诱导培养 将进行工作：重组蛋白的分离纯化 发酵培养 细胞破碎 离心 上清 镍亲和柱层析 希望实现目标 ---主要技术指标、产业化前景 目标：ALA生物法批量制备 基因克隆表达 酶分离纯化 发酵工艺优化 生物制备 初期应用试验 致谢 恳请刘总批评、指导！ * 以马尿酸为原料 * * 以马尿酸为原料 *
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