-二硝基苯肼比色法.pptVIP

维生素A在食品中常以酯类形式存在，样品用苛性碱－乙醇溶液在抗氧化剂保护下，加热皂化后，可使其转化为游离的维生素A，然后用有机溶剂提取。维生素A容易氧化，操作应在避光条件下进行。 通常采用RP-HPLC分析维生素A，其优点是能以短链视黄酯作内标物，而且可能同时分离测定类胡萝卜素、视黄酯及维生素E。但使用RP-HPLC时，往往需要先除去样品的非极性溶剂，再将其溶解于流动相或适宜溶剂中。在大多数情况下，紫外325nm检测维生素A都能获得足够的灵敏度和选择性，光电二极管阵列检测器的应用也越来越普遍。 测定维生素D的方法有比色法、分光光度法、气相色谱法和高效液相色谱法。比色法由于它的精密度及选择性差，只能用于较纯样品的测定。气相色谱法需要对样品衍生，操作麻烦。高效液相色谱法测定维生素D具有快速简便的特点，被AOAC选为正式的方法。 动物组织中所含维生素E的测定较复杂，在测定之前首先要除去类脂如胆固醇，它的存在会引起严重干扰。去除类脂通常采用有机溶剂提取。常用的有机溶剂是氯仿、丙酮、乙醚和乙醇。从样品中提取维生素E有皂化法及直接提取法两种。 直接提取法：用有机溶剂直接提取，然后在低温下进行浓缩结晶。除去脂类，将维生素E分离出来。对一些植物性样品可以用热的乙醇或丙二醇及氯仿在索氏提取器中将脂溶性物质提出来。 提取后净化处理：固相萃取法和TLC等。 （1） 2，4-二硝基苯肼比色法（GB 1