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免疫表型检测在白血病诊断分型中的应用 王光彦1） 杨思俊1） 杨荣聪2） （1．云南省楚雄彝族自治州人民医院医学检验科细胞形态室,云南 楚雄675000；2．楚雄医药高等专科学校检验系，云南 楚雄675000） [摘要] 目的 探讨细胞免疫表型检测在白血病诊断及分型中的应用价值。方法 应用ABC-AP免疫组化二步法检测60例白血病细胞14种抗原标记，结合临床、骨髓细胞形态学及细胞组织化学染色对白血病进行诊断及分型。结果58例初发白血病患者中，急性髓细胞白血病(AML)27例(45.0%),急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)18例(30.0%),急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)5例(8.3%),慢性淋巴细胞白血病（CLL）6例（10.0%），慢性髓细胞白血病（CML）2例（3.3%），慢粒急淋变(CML-ALL变)2例(3.3%)。结论:细胞免疫表型检测白血病细胞抗原，为白血病的诊断及分型提供了重要依据有较大价值。 [关键词] 白血病；免疫细胞化学染色；单克隆抗体；白血病免疫表型。 血液细胞形态学和细胞化学染色（ＭＣ）检查是白血病诊断非常重要的手段，但有些类型必须结合细胞免疫表型检测才能确诊。血液肿瘤白血病细胞免疫分型是利用单克隆抗体检测白血病细胞的细胞膜或细胞浆抗原，分析其细胞免疫表型，以了解被测白血病细胞所属细胞系列及其分化程度。我们对60例住院及门诊白血病患者应用免疫细胞化学染色检测白血病细胞抗原，并对白血病再进一步进行诊断及免疫表型分析。 1.材料与方法 1.1研究对象：选择我院２００５年９月以来住院及门诊白血病患者60例患者(初发58例)。其中，男40例，女20例，年龄5-80岁，平均年龄43.3岁(14岁以下儿童4例)。 1.2研究方法：取患者初诊或化疗前骨髓及外周血细胞涂片进行MC诊断，然后用形态学诊为白血病的新鲜骨髓涂片应用抗生物素蛋白生物素复合物(ABC-AP)免疫细胞化学染色常规操作，显色后以苏木素复染，显微镜观察并计数阳性细胞百分率。阳性判断标准：以髓系白血病细胞阳性率≥20%, 淋系白血病细胞阳性率≥30%者判为阳性。其他抗原≥20%为阳性【1】。 1.3试剂：白血病免疫分型检测试剂盒选自进口分装单克隆抗体。T细胞系列：CD3、CD5、CD7；B细胞系列：CD1O、CD19、CD20；髓细胞系列：CD13、CD14、CD33、CD68、MPO、巨核细胞系：CD41、非系列特异性：CD34、HLA-DR。 2.结果 2.1 MC及免疫表型检测结果分析：58列初发白血病患者中，急性髓细胞白血病(AML)27例占45.0%,急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)18例占30.0%,急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)5例占8.3%,慢性淋巴细胞白血病(CLL)6例占10.0%,慢性髓细胞白血病(CML)2例占3.3%,慢粒急淋变(CML-ALL变)2例占3.3%。 2.2白血病细胞免疫表型检测 2.2.1髓细胞系相关抗原在27例AML中有不同程度表达，本组病例检测阳性率顺序为CD68MPOCDl3CD33CD34CDI4。1例AML-M5伴随CD10+,其余26例AML均无淋巴细胞系相关抗原表达。27例AMLMC与白血病细胞免疫表型检测结果见表1。 2.2.2 23例ALL中，B-ALL18例占78.3%,T-ALL5例占21.7%。18例B-ALL中CD19+77.8%(14/18)，CD10+50.0%(9/18),CD20+38.9%(7/18),HLA-DR+94.4%(17/18),2例伴随CD68+表达。5例T-ALL中CD7+占80.0%(4/5),CD3+60.0%(3/5),CD5+40.0%(2/5),HLA-DR均不表达，2例伴随CD68+表达。23例ALLMC与白血病细胞免疫表型检测结果见表2。 表1 27例AML形态学分型与免疫学标记结果 白血病类型 例数 HLA-DR CD34 CD68 CD13 CD33 CD14 MPO M0 2 2/2 2/2 1/2 2/2 2/2 / 1/2 M1 2 1/2 2/2 1/2 1/2 0 0/1 2/2 M2 11 8/10 0/4 9/10 9/10 1/4 0/5 8/10 M3 4 0/4 0/2 4/4 2/4 0/1 0/1 3/4 M4 2 2/2 0/2 2/2 1/2 0/1 / 2/2 M5 5 4/5 0/2 5/5 5/5 0/3 2/5 5/5 M6 1 1/1 / 0 1/1 0 0 1/1 总例数 27 18/26 4/14 22/25 21/26