NY_T 1247-2006 禽网状内皮增生病诊断技术.docVIP

禽网状内皮增生病诊断技术 Diagnostic technique for avian teticuloendotheliosis 2006-12-06 发布 2007-02-01 实施 前 言 禽网状内皮增生病病毒(Reticuloendotheliosis Viruses，REV)是一群不同于禽白血病病毒(Avian Leukosis Viruses，ALV)的反转录病毒，它包括一群血清学上密切相关的从不同种禽类分离到的病毒。代表毒株有：从患有肿瘤的火鸡分离到的T株、鸭坏死性肝炎病毒(SNV)、鸡合胞体病毒(CSV)、鸭传染性贫血病毒(DIAV)。以后又不断从不同的家禽和野禽分离到该类病毒，就不再单独命名，只给予病毒株名。 REV属C一型反转录病毒，有囊膜，呈球形，直径80m～110μm。其病毒粒子中的基因组是由二条相同的单股RNA以非共价键连接在一起组成的，每条链长约8 kb9 kb核苷酸。 REV被列为鸡群中除马立克氏病病毒(MDV)和ALV外的第三类致肿瘤病毒。由于REV可感染不同禽类，分别引起从亚临床感染到生长迟缓、免疫抑制和肿瘤等不同的临床和病理变化，很容易与其他引起类似症状和病理变化的疾病相混淆，在现场对该病的鉴别诊断就比较困难。人们注意到REV常常污染活疫苗(如马立克氏病和禽痘的活疫苗)，但对其自然感染造成的经济损失还一直估计不足。 本标准的(OIE)的《诊断试验和疫苗标准手册2000版)有关章节。 本标准的附录A、附录B、附录C和附录D为规范性附录。 本标准由中华人民共和国农业部提出。 本标准由全国动物防疫标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：山东农业大学。 本标准主要起草人：崔治中、孙淑红。 1 范围 本标准规定了禽网状内皮增生病诊断的技术要求。它包括两方面： 对禽网状内皮增生病病毒(REV)特异血清抗体的检测； 病料及生物制品中传染性REV的检测。 本标准适用于： 检测REV的特异性抗体，用以判断禽群体(场)或个体是否感染过REV；特别适用于SPF鸡场中是否存在V感染的大批样品的抽检； 检测疑似病禽的病料或某些弱毒疫苗中是否存在传染性REV。2 疾病的流行病学和致病作用 禽网状内皮增生病的病原REV可感染鸡、火鸡、鹌鹑、鸭和鹅等多种家禽及一些野生鸟类。该病毒既可水平感染，也可通过鸡(禽)胚垂直感染。当种禽在开产后才感染REV时，会有一短暂的病毒血症期，此期间可造成垂直感染。此外，部分个体在感染后可呈现耐受性病毒血症，即持续性的病毒血症。这些个体血清中可能产生抗体，但也可能不产生抗体。这些鸡(禽)不一定表现临床症状，但它们更是鸡(禽)群体中造成垂直感染的主要来源。垂直感染的禽或在出壳后不久感染REV的个体(如由于应用了污染REV的疫苗)，最容易产生耐受性病毒血症。 REV感染鸡群后，虽然可分别引起生长迟缓、免疫抑制或肿瘤发生，诱发完全不同的临床表现和病理变化，但在过去几十年中，并没有造成严重的流行。只是在REV污染的活病毒疫苗大面积使用时，才会造成严重的经济损失。 当REV感染雏鸡群后，可在一部分鸡引起无特殊临床表现的生长迟缓和免疫抑制。剖检时可见法氏囊和胸腺不同程度的萎缩，并导致对某些疫苗(如新城疫疫苗)免疫反应的显著下降。REV引起的肿瘤既可见于6月龄以上的成年鸡，也可见于2月～3月龄鸡。既可引发网状细胞或其他非淋巴细胞类细胞的肿瘤，也可诱发淋巴(T淋巴细胞肿瘤或B淋巴细胞肿瘤)。因此，除非做病原学鉴定，仅根据流行病学、临床表现和病理变化是很难与鸡的马立克氏病或白血病肿瘤相鉴别的，也很难与其他免疫抑制性病毒(如鸡传染性贫血病毒)感染相区别。 近两年来，在我国所做的血清流行病学调查和现场病例实验室诊断结果分析表明，在60％以上的鸡群(场)已有REV感染。在病理上诊断为马立克氏病肿瘤或J亚型白血病肿瘤的现场样品中，在分离到马立克氏病病毒(ⅧV)或J一亚型白血病病毒( J)的同时，也有近50％的样品同时分离到 REV。在表现为生REV与鸡传染性贫血病毒的共感染。显然，在鸡群感染REV时，其发病作用往往是在与其他病毒共感染过程中，以相互协同作用的形式表现出来的。正因为REV感染时还经常发生其他病毒的多重感染，使现场病例的鉴别诊断变得更为复杂。因此，对REV感染的实验室诊断显得更为重要。 3病毒的分离培养和鉴定 3．1病料的采集 疑似病鸡的血清或血浆，采集后经处理立即用于接种鸡胚成纤维细胞(CEF)培养或置于70℃保存备用。疑似病鸡的脾脏、肝脏、肾脏，采集后立即研磨成悬浮液供接种C