TTC法检测牛奶中抗菌药物的研究毕业论文.docVIP

天津渤海职业技术学院 毕业环节论文 系 部： 生物工程系 专 业： 生物化工工艺 学生姓名: 袁亚龙 学 号: 36号 设计(论文)题目： TTC法检测牛奶中抗菌药物的研究 起 止 日 期: 2010.12～2011.4 设计(论文) 地点: 天津渤海职业技术学院 指 导 教 师: 张荟 日期: 2011 年 4 月14 日 目录 TTC法检测牛奶中抗菌药物的研究···············1 一．牛奶中抗生素残留的来源及其危害············2 二．抗生素的检测标准···················4 三．TTC法实验·······················4 四．实验结果与分析 ··················5 参考文献·······················7 TTC法检测牛奶中抗菌药物的研究 摘要：针对用TTC法检测牛奶抗菌药物残留过程中因为在被检乳样中加入指菌的数量不稳定而影响检测的问题，本研究增设了菌液稀释度试验以确定加入的菌液量。同时，采用TTC法对奶牛场常用的几种抗菌药物检测其乳中最低检测浓度。结果是：青霉素3μg/kg，链霉素660μg/kg，庆大霉素620μg/kg，卡那霉素6200μg/kg，红霉素30μg/kg，环丙沙星500μg/kg，土霉素100μg/kg，金霉素100μg/kg，磺胺嘧啶100μg/kg。本研究用TTC法对青霉素、红霉素、土霉素、金霉素和磺胺嘧啶的检测灵敏度均达到农业部规定的牛乳中兽药残留最高限量要求。TTC法具有简便、价廉的优点，并且所检测的抗菌素范围较广，符合我国奶牛场中使用抗菌药物种类较多的现状。 关键词：牛奶；TTC；抗菌物；抗生素；残留 一 牛奶中抗生素残留的来源及其危害1.1 牛奶中抗生素残留的来源一般认为，对泌乳牛用药不当或不注意安全时间是牛乳中抗生素残留的重要因素，尤其是使用乳房灌注法治疗乳腺炎时，易造成牛乳中抗生素残留。随着畜牧业的发展，在牛饲料中添加饲料添加剂已十分广泛，其中含量有一定比例的抗生素，主要作用是预防疾病的发生，这也是牛乳抗生素残留重要原因。此外，在高温季节，一些不法交奶户为防止乳的酸败，往往向牛乳中掺杂各种抗生素，这也是乳中抗生素残留的一个来源。1983年，Egan调查表明，重用经抗生素治疗的乳牛用过的挤乳器给正常乳牛挤乳，可使正常牛的乳中残留抗生素，于是他指出：挤乳是乳中抗生素残留的另一个来源。1.2 牛奶中抗生素残留的危害牛奶是老少皆宜的营养品，牛奶中若含有抗生素，对长期饮用者来说无疑是等于长期服用小剂量的抗生素，对抗生素有过敏体质的人服用残留抗生素的乳后会发生过敏反应。即使是正常饮用者，体内的某些条件性致病菌易产生耐药性，一旦患者再用同种抗生素治疗很难奏效。抗生素是奶牛场治疗乳房炎的常规药物。由于长期大量使用抗生素，使耐药菌株增加，一些乳房炎病例变得难以用常规方法治愈。 这又促使临诊兽医在治疗过程中加大抗生素的用量。此外，牛奶中抗生素残留会影响奶制品的品质，如果用含抗生素的奶做酸奶或乳酪等，则残留在其中的抗生素会抑制细菌的发酵，使产量和质量降低。因此市场不允许出售抗生素残留过量的牛奶，这样也造成牛奶生产者的经济损失。 2 牛奶中的抗生素残留检测方法研究进展2.1 微生物检测法 微生物检测法是应用较广泛的方法，如纸片法、 TTC法等等，因其测定原理基于抗生素对微生物的生理机能、代谢的抑制作用，因而与临床应用的要求一致，但其测定时间长且结果误差较大。目前趋向灵敏、准确、简便、快速的微生物检测方法研究，如酶标抗体检测法等。 用荧光免疫法测定牛奶中的6种β-内酰胺类抗生素，检测分析系统组成：一个内含4个毛细管的测定管、一个带有4个用来干燥试剂的的凹面的试剂盘和一个毛细管反应器。反应在毛细管反应器内进行，并通过毛细管反应器识别荧光显示结果，然后输出测定结果。牛奶中β-内酰胺类抗生素的最低检测限为：青霉素G,3.2 ppb、, 氨苄青霉素2.9 ppb 、羟氨苄青霉素,3.6 ppb 、邻氯青霉素,7.4 ppb 、头孢匹林,16.3 ppb 、头孢噻呋33.7 ppb。 4.1 实验结果 本研究用TTC法检测到的各类抗菌药物最低检出量以及农业部2002年12月发布的《动物性食品中兽药最高残留限量》所规定的有关抗菌药物在牛奶中允许的最高残