进出口食品中水溶性维生素的测定.docVIP

120前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009《标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写规则》的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出本标准由国家认证认可监督管理委员会归口。 进出口食品中水溶性维生素测定方法 －液相色谱-串联质谱法 范围 本标准规定了食品中水溶性维生素液相色谱-串联质谱测定方法。 本标准适用于水果、蔬菜、饮料、中硫胺素（维生素B1）、核黄素（维生素B2）、烟酸(维生素PP维生素B)、烟酰胺(维生素PP维生素B)、泛酸(维生素B5)、维生素B6（吡哆醇吡哆醛）、钴胺素（维生素B12）、叶酸（维生素M)、生物素（维生素H）L-肉碱 (维生素BT)的测定。GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 方法提要 试样用酸铵提取，液相色谱－串联质谱仪测定，法定量。 试剂和材料 除特殊规定外，所用有机试剂均为农残级，水为二次蒸馏水。 .1甲醇。.2甲酸，液相色谱纯 4.3乙酸铵，液相色谱纯。 氨水，分析纯。 .5盐酸，分析纯。.6 10 mmol/L乙酸铵.8 维生素标准： L-肉碱，硫胺素，烟酸，腺嘌呤，吡哆醛，吡哆醇，烟酰胺，泛酸，钴胺素，叶酸，生物素和核黄素纯度均为大于等于95% (w/w)。各化合物基本信息详见。 .9 标准储备液：钴胺素用浓HCl溶解，生物素、叶酸和泛酸用浓氨水溶解，其他维生素用水溶解。转入10 mL塑料离心管中，用黑纸包裹后，－18℃以下保存标准储备液保存期为一星期。标准液： 仪器和设备 .1 高效液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源(ESI)。 5.2 分析天平：感量为0.01 g，0.1 mg。 5.3 均质器，转速不小于15 000 r/min。 5.4 离心机，转速不小于4 000 r/min。 5.5 具塞棕色离心管，50 mL。 5.6 棕色容量瓶，25 mL。 5.7 涡旋混匀器。 .8 微孔滤膜0.22 μm，有机系。 试样制备与保存.1 粮谷、水果和蔬菜类 .2 果汁饮料和液态调味品 取有代表性样品约500 g，充分混匀，置于密闭的容器内，冷藏。 7 测定方法 .1 样品的提取.1.1粮谷 称取 g（精确至0.01 g）50 mL离心管中，加入酸铵（）0 mL，涡旋混匀 min，10 min，以4 000 r/min离心min。取上清液1 mL，0.22 μm微孔滤膜过滤。待测定。.1.2水果蔬菜称取10 g（精确至0.01 g）50 mL离心管中，加入酸铵（）0 mL，涡旋混匀 min，10 min，以4 000 r/min离心min。取上清液1 mL，0.22 μm微孔滤膜过滤。待测定。饮料称取 g（精确至0.01 g）用0.22 μm微孔滤膜过滤所得滤液待进样测定。酸铵（）用0.22 μm微孔滤膜过滤所得滤液待进样测定。同时进行空白.2 测定 .2.1 液相色谱参考条件 a) 色谱柱：BEH T3 50 mm×2.1mm（内径），1.7 μm，或相当者； b）流动相：A: （3.）；B: 10 mmol/L醋酸铵 ()；洗脱程序流速见表。 c）柱温：30℃； d）进样量：10 μL； 表1流动相洗脱程序 Time A% B% 流速（mL/min） 0 1 99 0.4 10.0 99 1 0.4 10.1 1 99 0.4 13.0 1 99 0. 7.2.2 质谱条件 a) )； b）检测方式：多反应监测（MRM）； c）毛细管电压：3.5 kV； d）离子源温度：110℃； e）去溶剂气温度：380℃； f) 去溶剂气（氮气）流量：600 L/h； g) 椎孔气（氮气）流量（N2）：40 L/h； h) 碰撞气（氩气）流量：0.1 L/h； i）定量离子对、定性离子和对碰撞能量等参数见附录中表2。 .2.3 定性分析 种维生素的1.5 min~7 min。与基质标准溶液的保浓度接近的基质标准工作溶液中对应的定性离子的相对丰度进行比较偏差不超过表规定的范围，则可判定为样品中存在对应的待测物表2 定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度 ＞50% ＞20%至50% ＞10%至20% ≤10% 允许相对偏差 ±10% ±15% ±20% ±50% .2.4 定量测定 .3 空白实验 除不称取试样外，均按上述步骤进行。 结果计算与表述 …………………………………(1) 式中： X——试样中被测组分含量，单位为毫克每千克（mg/kg）； C——从标准工作曲线上得到的被测组分溶液浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）； V——样品溶液定