进出口食品中β-呋喃果糖酶的测定编制说明.docVIP

《出口蜂蜜中β-呋喃果糖苷酶的测定》 编制说明 标准制定的任务来源及意义 1、任务来源 本标准是根据国家认证认可监督管理委员会下达的任务，由中华人民共和国江苏出入境检验检疫局、江苏中谱检测有限公司和秦皇岛出入境检验检疫局联合研究制定的名称为《出口蜂蜜中β-呋喃果糖苷酶的测定》，其计划编号为2010B131。技术归口单位为国家认证认可监督管理委员会。 2、制定标准的意义 蜂蜜是蜜蜂采集植物的花蜜、分泌物或蜜露，与自身分泌物结合后，经充分酿造而成的天然甜味物质。蜂蜜的主要成分是糖类，其中60%～80%是人体容易吸收的葡萄糖和果糖，而且含有多种氨基酸、酶类、矿物质、维生素和微量元素等成分。 蜂蜜是具有悠久历史的经典保健品之一，纯正的、质量好的蜂蜜具有很高的营养价值和功效，所以好的蜂蜜的销售的价格也较高。这也就刺激了一些不法商贩，为了利润而在蜂蜜中掺假，严重损害了消费者的利益，为此国家在2005年出台了关于蜂蜜的强制性国家标准，新标准中主要从三个强制性指标来判断蜂蜜的质量，即水分、果糖和葡萄糖总量及蔗糖含量。根据规定，蜂蜜中最多只能含有5%的蔗糖。如果企业在蜂蜜中非法加入糖浆、白砂糖等成分，必然造成糖类不合格，所以测定蜂蜜中糖类具有重要的意义。但由于我国幅员辽阔，蜂蜜品种较多，除了糖之外，很难对蜂蜜中的其它成分做统一的指标要求，单单规定糖的指标，相对简单，给掺杂造假留下了很大的空间。随着新国标实施以来，针对新国标的掺杂造假的方法不断出现，掺杂后的蜂蜜各项指标都能符合国标的要求。因此需要不断的研究新的鉴别蜂蜜掺杂造假的方法。 目前测定蜂蜜掺假主要有三种方法： (1) C-稳定同位素分析法（AOAC方法998.12），纯蜂蜜中含有糖和蛋白质的同位素值是一致的，掺杂造假时通常加入的仅仅是糖。如果加入的糖为C4植物糖（甘蔗蔗糖、玉米糖浆），由于C4植物糖和来源于C3植物的蜂蜜中的糖的同位素值存在明显差异，因此加入糖后，蜂蜜中糖的同位素值改变了，而蜂蜜中蛋白的同位素值并没有改变，因此用该种方法将整个蜂蜜的C12同位素和C13同位素与蜂蜜蛋白质的这两种同位素相比较,以确定蜂蜜中是否含有C4糖，蜂蜜中C4糖的份额越高，则蛋白质与蜂蜜值之间的商越负。但是因为同位素关系的转移明显变小，该方法只能用于证明掺杂物比较高的蜂蜜。而且目前存在通过C3植物糖来进行掺杂造假的现象，而这种掺杂造假的方法，通过同位素方法就根本无法进行鉴别。 （2）高效液相色谱示差折光法（HPLC-RID），借助于带有示差折光检测器识别的高效液相色谱仪可以将果糖、葡萄糖、蔗糖和麦芽糖进行分离，直接测定蜂蜜中这四种糖的含量，以判断蜂蜜中的糖是否符合国家标准。如果蜂蜜中掺杂了麦芽糖浆或蔗糖在此处会凸现出来。 （3）薄层色谱法（TLC）。蜂蜜中所含有只有单糖、二糖和三糖，不含有四糖以上的多糖。通过掺杂淀粉糖浆的过程中不可避免的会带入四糖以上的多糖。通过一定的前处理分离提纯后，薄层色谱分离，显色，可以鉴定蜂蜜中通过掺杂造假带入的多糖，从而鉴别蜂蜜中是否加入了淀粉转化糖浆。 但是目前这三种方法仍不能完全鉴别蜂蜜中的掺杂造假行为。根据糖浆的生产工艺，糖浆在生产过程中，不可避免会使用到各种酶进行酶解和转化，针对蜂蜜中外来酶进行研究，用以鉴别蜂蜜中的掺杂造假是近年来出现的新方法。目前有国外的实验室有相关的研究，但国内未见相关的报道。 β-呋喃果糖苷酶又称蔗糖酶或转化酶，可以催化水解β-D-果糖苷键，将蔗糖直接转化成葡萄糖和果糖。天然蜂蜜含有α-葡萄糖 二、编制依据 本标准的编制遵循GB/T 1.1-2000《标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写规则》和GB/T 20001.4-2001《标准编写规则 第4部分：化学分析方法》的要求进行编写制订的。 三、标准制定过程 本标准起草单位在收到认监委的任务下达文件后，成立了标准起草小组，，并制定了时间进度表（见表）。 本标准起草人通过查询相关资料和文献，结合使用实际情况，建立了中的液相色谱测定方法，经实验研究验证后，方法的灵敏度、特异性和选择性均能满足检测要求。 表 本标准制定工作时间进度安排 时间 工作内容 完成情况 2010.1 ~2010.3 查阅并整理相关文献资料，购买标准品或样品；确定标准的技术路线。 完成 2010.4~2011.5 进行方法的前处理实验研究，优化前处理条件和检测条件；进行方法室内和室间验证，起草标准征求意见稿。 完成 2011.6 征求意见，汇总意见，形成送审稿。 完成 β-呋喃果糖苷酶的测定》，但由于检测的基质主要为蜂蜜，而且目前出入境行业标准均为“出口”，所以改名为《出口蜂蜜中β-呋喃果糖苷酶的测定》 四、主要试验技术论证 目前本标准利用高效液相色谱对中进行了测定 108724 66326.6 2、酶解反应最佳