进出口食品中苯二氮卓类药物的测定.docVIP

前 言 本标准由中华人民共和国国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准由中华人民共和国重庆出入境检验检疫局、上海出入境检验检疫局负责起草。 本标准主要起草人：。 本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。进出口食品中苯二氮卓类药物的 液相色谱-质谱/质谱法 范围 本标准规定了进出口保健食品和动物源性食品中普拉西泮、去甲西泮、氯氮卓、替马西泮、三唑仑、氯巴占、奥沙西泮、硝西泮、氟西泮、氯甲西泮、阿普唑仑、艾司唑仑、劳拉西泮、氯硝西泮、氟硝西泮、地西泮、咪达唑仑、去烷基氟西泮、去甲基氟硝西泮、α-羟基咪达唑仑、7-氨基氟硝西泮、2-羟基氟西泮等苯二氮卓类药物残留量的制样和液相色谱-质谱/质谱检测方法。 本标准适用于保健食品（片剂、冲剂、胶囊、糖浆、口服液）、猪肉和牛奶中苯二氮卓类药物残留量的测定和确证。 方法提要 保健食品试样中的苯二氮卓类药物用二氯甲烷-乙醚混合溶液提取，提取液经浓缩后，液相色谱-质谱测定，内标法定量。 猪肉试样中的苯二氮卓类药物采用β-盐酸葡萄糖醛甙酶-芳基硫酸酯酶水解，在碱性条件下用乙酸乙酯-异丙醇混合溶液提取，阳离子交换小柱净化，液相色谱-质谱测定，内标法定量。 试剂和材料 除特殊注明外，所有试剂均为分析纯，水为二次蒸馏水。 甲醇：高效液相色谱级。 乙腈：高效液相色谱级。 乙酸铵。 乙酸乙酯。 异丙醇。 二氯甲烷：高效液相色谱级。 乙醚：高效液相色谱级。 氨水 β-盐酸葡萄糖醛甙酶-芳基硫酸酯酶：含β-盐酸葡萄糖醛甙酶134600单位/mL芳基硫酸酯酶5200单位/mL。 乙酸铵缓冲溶液0.02 mol/L，pH = 5.2。1.54 g乙酸铵溶解于900 mL水中，用冰乙酸调节pH到5.2 ( 0.1，最后用水稀释到1 L，贮存于4 ℃，使用期为1个月。 ( 0.1，最后用水稀释到1 L。 二氯甲烷-乙醚：800 mL二氯甲烷中加入200 mL乙醚，混匀。 乙酸乙酯-异丙醇：1000 mL乙酸乙酯中加入200 mL异丙醇，混匀。 乙腈-水溶液：20 mL乙腈中加入80 mL水，混匀。现配现用。 0.1 mol/L HCl溶液mL浓盐酸（3.11）用水稀释到 1L。 苯二氮卓标准物质：。物质均为1.0 mg/mL的甲醇溶液，同位素内标标准物质为100.0 μg/mL甲醇溶液。 标准中间溶液：用乙腈分别稀释标准物质溶液至终浓度约为1.0 μg/mL和100.0 ng/mL，低于5℃保存，有效期为6个月。 同位素内标标准工作溶液：用乙腈分别稀释同位素内标标准溶液至终浓度为100.0 ng/mL，低于5℃保存，有效期为6个月。 标准工作液：根据需要，临用时吸取一定量的混合标准中间溶液（3.）和混合同位素内标溶液（3.），用乙腈水（）稀释配制成适当浓度的混合标准工作溶液(参考线性浓度范围为1.0至50.0 ng/mL)，每混合标准工作溶液含有同位素内标各10.0 ng。现配现用。 阳离子交换小柱：360mg或相当者5 mL甲醇5 mL水活化。 0.22 μm微孔滤膜有机系。 仪器和设备 高效液相色谱-质谱/质谱仪，配电喷雾离子源（ESI）。 电子天平：感量为0.01 g和0.1mg。 超声波清洗器。 旋涡混匀器。 恒温箱。 氮吹仪。 离心机：5000 r/min。 容量瓶：0 mL、50 mL、10 mL。 具塞塑料离心管：50 mL。 试样的制备与保存 胶囊、片剂、冲剂取有代表性样约100 g，用碾钵碾碎（胶囊、片剂同时将糖衣和胶囊壳碾碎），装入洁净容器作为试样，密封并做好标识，于常温保存。 糖浆、口服液取有代表性样约100 g搅拌均匀后装入洁净容器内密封并做好标识，于4 ℃冰箱内保存。 肌肉：取有代表性样约500 g，用组织捣碎机捣碎，装入洁净容器作为试样，密封并做好标识，于-18 ℃冰箱内保存。牛奶装入洁净容器内密封并做好标识，于4 ℃冰箱内保存。 测定步骤 提取 保健食品（胶囊、片剂、冲剂、糖浆、口服液） 准确称取2.0 g试样（精确到0.01 g）于50 mL具塞离心管中，加入10 mL缓冲液，用mol/L的氢氧化钠调节pH11.0左右，添加200 μg/L的同位素内标100 μL于待测样品中，加入20mL二氯甲烷-乙醚溶液（3.1），加盖混匀后超声10min，涡旋振荡5 min，6500r/min离心5min；取上层有机相于100 mL旋蒸瓶中，再用20 mL二氯甲烷-乙醚溶液（3.1）重复提取两次，合并提取液氮吹仪上在不高于40℃下蒸干。加入1.0 mL乙腈-水溶液3.19）振荡溶解残渣，过0.22 μm有机滤膜后供液相色谱-质谱测定。肌肉 称取5.0 g试样（精确至0.1 g）于50 mL塑料离心管中，加入15.0 mL乙酸铵缓冲溶液.14），在2000 r/min下涡旋混