白酒中甲醇超标的快速检测方法.docVIP

识别酱油制造工艺现场快速检测及实验室检测方法 （国家食品质量监督检验中心） 一、现场快速检测方法 1 范围 该方法是一种识别酱油制造工艺的快速目视比色方法,适用于酱油样品中乙酰丙酸含量的检测,可对非酿造酱油进行现场识别。 该方法的最低检测限为0.25g/L。 2 原理 试样中的乙酰丙酸在重铬酸钾氧化下，硫酸介质中加入香草醛，呈现绿色，颜色深浅与乙酰丙酸含量有关，由此可对乙酰丙酸进行半定量检测。 3 试剂和溶液 3.1 乙醚（A试剂） 3.2 0.01mol/L重铬酸钾溶液（B试剂） 称取0.30g重铬酸钾,用水溶解并定容至100 mL，有效期6个月； 3.3 0.5mol/L 硫酸溶液（C试剂） 移取1.50mL浓硫酸，注入水中，定容至100mL，有效期6个月； 3.4 5g/L香草醛溶液（D试剂） 称取0.50g香草醛，用50％（v/v）乙醇溶液溶解并定容至100 mL，移入棕色瓶中，避光，低温保存，有效期为1个月（也可临用时现配）； 3.5 乙酰丙酸标准使用溶液 3.5.1 10g/L乙酰丙酸标准溶液 称取1.000g乙酰丙酸，用水溶解并定容至100 mL； 3.5.2 乙酰丙酸标准使用溶液 吸取10g/L乙酰丙酸标准溶液10.0 mL注入100 mL容量瓶中，用水稀释至刻度，其乙酰丙酸含量分别为1.0g/L。 4 仪器设备 4.1 可调式电热板1台； 4.2 旋涡混合器1台； 4.3 2mL(或5mL)塑料离心管数支； 4.4 塑料离心管架1个； 4.5 能定量的塑料吸管数支； 4.6 瓷点滴板数块 5 分析步骤 5.1 用能定量的滴管分别加入1 mL A试剂于样品和标样离心管中； 5.2 向样品离心管中加入待检酱油0.5mL，同时向标样管中加入浓度为1.0g/L的乙酰丙酸标准溶液0.5mL；在旋涡混合器上振荡30秒，放置3～5分钟； 5.3 待分层后，取上层溶液加2滴至瓷点滴板上，迅速加入1滴B试剂、1滴C试剂、2滴D试剂，用玻璃棒搅拌均匀，放置预热的可调式电热板上，在5分钟之内样品与标样比色。 6 结果判定 6.1 如果标称为酿造酱油的样品显色深于乙酰丙酸浓度为1.0g/L的标样,则该样品可能为非酿造酱油； 6.2 现场初步判定为非酿造酱油还需抽样送法定质检机构检验确认。 7 注意事项 7.1 显色时间对比色影响较大，时间长，颜色深，时间短，颜色浅，故在操作时，应调整可调式电热板至适当温度，使比色在5分钟左右完成； 7.2 注意滴加酱油样品、标样和试剂量的一致性，及检测步骤和检测时间的同步性； 7.3 试样显色为非绿色（如黄褐色）时，不作非酿造酱油的判定； 7.4 为便于观察试样颜色变化，建议试样进行平行试验。 二、实验室检测方法 1 原理 在酱油的感官指标中，色泽是重要的指标之一。生抽酿造酱油的色泽主要应该是天然发酵过程中产生的，但劣质酱油和配制酱油的色泽主要来源于人为添加的焦糖色，而这些焦糖色素主要是以氨法生产，在生产过程中会产生一定量的4-甲基咪唑，经动物毒理学实验证明，4-甲基咪唑是一种对人体有害的物质，根据对该物质的检测可以对纯生抽酿造酱油的制造工艺方式进行判断。目前，含焦糖色素食品中带入的4-甲基咪唑因食品中组分多、分离纯化困难而缺少专门的、行之有效的检测方法。 本方法采用固相萃取方法对酱油样品进行前处理，固相萃取是一种吸附剂萃取，当样品通过填充吸附剂的固相萃取柱后，目标组分和杂质被吸附在萃取柱上，用选择性溶剂去除杂质后，再用少量溶剂将待测组分洗脱出来，从而达到目标组分与干扰组分分离的目的。 再利用样品中各种组分在气相色谱柱的气固两项中分配系数的不同，将样品中的4-甲基咪唑与其他组分分离。利用氮磷检测器进行检测，外标法定量。 该方法主要适合生抽酿造酱油和用氨法生产焦糖色配制生抽酱油工艺的识别，也有利于劣质有害酱油的筛选。 2 试剂 2.1甲醇：分析纯 2.2 氢氧化钠溶液：3.0 mol/L 2.3 二氯甲烷：分析纯 2.4 四氯化碳：分析纯 2.5 4-甲基咪唑系列标准溶液的配制： 以甲醇为溶剂，配制浓度为10mg/L的标准储备液若干量，精确吸取标准储备液0.05mL、0.10mL、1.00mL、5.00mL、10.00mL分别以甲醇为溶剂定容至10mL，得浓度为0.05mg/L、0.10mg/L、1.00mg/L、5.00mg/L、10.00mg/L的系列标准溶液。 3 仪器、设备 3.1 CHROMABOND XTR固相萃取柱（1000mg,6mL）。 3.2 气相色谱仪。 3.3 氮磷检测器。 3.4色谱柱：HP-5毛细管柱(30m×0.25mm i.d.×0.25μm film)。 3.5 真空旋转