LTQ-Orbitrap液-质联用技术对水牛奶酪蛋白的鉴定.pdfVIP

98 2012，Vo1．33，No．O1 晶 科 学 ※基础研究 LTQ—Orbitrap液-质联用技术对水牛奶 酪蛋白的鉴定 王丽娜 ，徐 明芳 ，成希飞，向明霞，李子超，李昀锴 (暨南大学生命科学技术学院，广东广州 510632) 摘 要：建立一种快速、高效的分析酪蛋白组分氨基酸序列的LTQ-Orbitrap质谱方法 。为了研究水牛奶酪蛋白、 乳牛奶酪蛋白和山羊奶酪蛋白的氨基酸序列组成及氨基酸的替换现象，采用LTQ—Orbitrap液 ．质联用技术分别对乳 源酪蛋白的4种主要组分进行分析，搜索数据库获得4种组分的氨基酸全序列。与水牛奶4种酪蛋白组分进行比对。 结果表明，乳牛奶的4种酪蛋白发生氨基酸替换的部位和比率明显小于山羊奶。这意味着与水牛奶酪蛋白相比，乳 牛奶酪蛋白氨基酸的稳定性优于山羊奶酪蛋 白。 关键词 ：水牛奶；酪蛋 白；氨基酸序列；酪蛋白结构；LTQ—Orbitrap质谱 IdentificationofWaterBuffaloCaseinsbyLiquidChromatographyandLTQ-OrbitrapMassSpectroscopy W ANG Li—na，XU M ing—fang ，CHENG Xi—fei，XIANG Ming—xia，LIZi—chao，LIYun-kai (CollegeofLifeScienceandTechnology，JinnaUniversity，Gunagzhou 510632，China) Abstract：ArapidnadefficientmethodtoanalyzehteaminoacidsequenceofcaseinWaspresentedusingLTQ—Orbiwapinass spectroscopycoupledwithliquidchromatography．InordertounderstandtheaminoacidsequenceandsubstitutionofCOW， waterbuffaloandgoatcaseins，LTQ—Orbitrapmassspectroscopycoupledwithliquidchromatographywasusedtoanalyze4 majorcaseincomponents，andtheircompleteaminoacidsequenceswereacquiredbydatabasesearching．Theanlinoacid substitutionsofCOW miIkcaseinsweremrakedlylowerhtanhtoseofgoatmilkcaseins．Thus．thisstudydemonstratesthatthe aminoacidsequencesofCOW mi lkcaseinsaremorestablehtna thoseofgoatmilkcaseins． Keywords：waterbuffalomilk；casein；aminoacidsequence；caseinstructure；LTQ·Orbitrapmassspectrometry 中图分类号：Q657．6 文献标识码：A 文章编号：1002—6630(2012)01—0098-05 水牛奶是我国奶业特别是我 国南方奶业的一个重要 序列非常准确，但速度较慢，费用较高。氨基酸分析法 发展方 向，其主要营养成分高于荷斯坦乳牛奶，是未 经济快速，但灵敏度低 】。二维线性离子阱高分辨静 电 来最具市场竞争力的乳品…。国内外对水牛奶的研究越 场组合质谱仪(LTQOrbitrapXL)是 目前最先进的质谱仪，它 来越多，主要是常规营养成分[2-3]、理化性质[4-5】、稳定 将LTQ与获得专利的Orbirtap技术整合，具有无可超越的 性 6『1、乳蛋白质的组成和特性 7【_s]以及蛋白分离分析[9-12等