牛种布鲁氏菌弱毒疫苗株s19与构建株Δs19全菌蛋白比较蛋白质组研究.pdf

摘 要 布鲁氏菌病是布鲁氏菌侵入机体引起变态反应的人畜共患传染病。该病广泛 分布于世界各地，在许多国家都有不同程度的流行。人患此病主要由于接触感染 的家畜，病期可长达数月、数年，甚至几十年，严重时可致残，丧失劳动能力， 家畜患布病后出现流产、死胎、不孕、乳腺炎和睾丸炎等，造成巨大经济损失， 严重影响畜牧业发展。布病的治病机理尚完全清楚，相关的毒力因子主要包括： 歧化酶，热休克蛋白，Ⅳ型分泌系统等。已有相对有效的疫苗，但是感染后的家 畜很难区分是自然感染还是免疫接种感染。为了区分是自然感染还是疫苗接种感 染，在s19的基础上构建了基因突变株△S19，用于区分是自然感染还是疫苗接 种感染。经过前基因组学及疫苗免疫接种实验都证明该菌株构建成功，出于前基 因组的局限性不能说明基因改造后蛋白质变化情况。基于此，应用蛋白质组学的 方法，对改造后的蛋白质进行了验证。 对两株菌进行培养、收集、全菌蛋白提取，利用双向电泳技术，质谱鉴定和 生物信息学三大技术比较分析As19与s19蛋白质变化情况。 Master 对两菌株的双向电泳图谱进行Image 6．0软件分析和比较，结果发现： 两菌株均约有650-a：10个蛋白点可被检测到，蛋白质差异表达量1．5倍以上的点