阿维菌素类药物对玫瑰无须鲃及牙鲆鳃细胞系毒性效应.pdf

中国海洋大学博l：论文 阿维菌素类药物对玫瑰无须龟巴和牙鲆鳃细胞系的毒性效应 摘要 水体是农药等各种污染物的最终归宿。农药对水环境的污染和对水生生 物的毒性作用一直是人们关注的热点问题。本文以玫瑰无须鳃和牙鲆鳃细胞 系为研究对象，通过体内和体外两种毒性检测系统，研究了生物农药——阿 无须鳃精子及牙鲆鳃细胞系的毒性效应。 首先，通过光镜和电镜观察，研究了abamectin对玫瑰无须鲤精子活力 和超微结构的影响。研究发现，(1)abamectin对玫瑰无须囱巴精子具有毒性作 用。0．14pmol／Labamectin即对玫瑰无须鳃精子的活力产生抑制。(2) abamectin对玫瑰无须鱼巴精子活力的影响具有时间和浓度依赖性。随着药液浓 度的增加和作用UIIiJ的延长，精子运动率显著下降。(3)电镜观察发现，经 阿维菌素处理后，玫瑰无须鳃精子的超微结构发生明显变化，包括头部膨胀、 变形甚至溶解，细胞核电子密度增大：中片部位的细胞膜局部破裂，出现漏 ‘ 洞，线粒体严重受损；鞭毛末端弯曲或脱落等。其中以中片部位线粒体处损 伤最为明显严重。由此推出，线粒体可能是abamectin作用于玫瑰无须刍巴精 子的主要靶器官。线粒体的损伤使得能量供给不足，致使精子活力显著下降。 上述结果表明，玫瑰无须鳃精子是生物农药如阿维菌素毒性体外快速检测的 理想系统。 其次，通过光镜观察和分光光度法，研究了abamectiz对牙鲆鳃细胞系 生长速度和抗氧化酶系统的影响。研究发现，(1)abamectin对牙鲆鳃细胞系 具有毒性作用。5—20肚mol／L 岫ol／L abamectin可引起牙鲆鳃细胞抗氧化酶活性及超氧阴离子(0：一)含量 的迅速应答。将牙鲆鳃细胞暴露于abamectin2小时后，SOD、CAT和GSH—Px 活性迅速升高，但随后下降并维持在低于对照组的水平上；0：一含量也迅速上 升，至细胞与药液接触6h后达到最高，随后O。含量一直维持在显著高于对 照组的水平上。结果表明，abamectin可以破坏牙鲆鳃细胞氧化／抗氧化酶系 统的平衡，引起自身防御系统功能紊乱，使细胞处于亚健康状态，抑制细胞 的生长，甚至中毒死亡。 再次，经急性、亚急性毒性实验和HE染片观察，研究了abamectin对玫 对玫瑰无须鳃96h半致死浓度为0．2pmol／L。(2)亚致死浓度的abamectin 作用于玫瑰无须纪2l天后，玫瑰无须鲤精子运动率明显低于对照组精子运动 率(P0．05)。精子运动时间随着作用浓度的增加显著下降(尸0．05)。(3) abamectin对玫瑰无须啬巴鳃、肾脏、肝脏和精巢等组织结构具有破坏作用。亚 致死浓度的abamectin作用于玫瑰无须鲍2l天后，玫瑰无须鳃鳃部的病变最 为明显，主要表现为上皮细胞增生和漂移。高剂量处理组还出现鳃小片融合 和顶端异常化等显著病理特征。肾脏的主要病变为出现大量的色素物质、肾 小管上皮细胞肿胀崩解、肾小球毛细血管充血甚至坏死降解等。肝脏的主要 病变为血管充血、血管壁溶解及周边细胞坏死、细胞膜溶解、肝实质细胞分 离、核溶解及大的坏死等。精巢的变化是随着作用浓度的增加，连接组织显 著增生，生殖细胞数量减少及部分精原细胞受损等。鳃、肝脏及肾脏分别是 鱼类重要的呼吸、代谢和排泄器官，其结构受损，必然会影响功能的正常发 挥，使鱼体呼吸受阻、代谢紊乱、机体不适，进而死亡。 最后，我们还研究了伊维菌素对玫瑰无须鲍的96 h半致死浓度，以及IVM 对玫瑰无须鲍精子活力和牙鲆鳃细胞生长速度的影响。研究表明，牙鲆鳃细 胞暴露于伊维菌素96h后，27．8扯mol／L IVM对细胞生长抑制程度达50％： 1 I』_mol／L IVM对玫瑰无须自巴精子的运动率和运动时间产生影响；而IVM对玫 瑰无须鳃96h的LC50仅为0．03帅ol／L。这说明IVM对三者都具有一定的 毒性作用，其中以玫瑰无须鳃成体鱼对IVM最为敏感。通过对上述结果分析， 可以得出以下结论：(1)污染物自身性质对毒性检测方法的灵敏性可能有一 定影响。(2)体外毒性测试作为一种快速、灵敏、经济、有效的水体污染物 毒性