第六节酶活力测定及酶的分离纯化.pptVIP

测定酶活的方法： 终点法: 测定完成一定量反应所用时间。 动力学法:测定一定时间所起的化学反应量。  酶活力的表示方法 酶的分离提纯 1、基本原则：提取过程中避免酶变性而失去活性；防止强酸、强碱、高温和剧烈搅拌等；要求在低温下操作，加入的化学试剂不使酶变性，操作中加入缓冲溶液. 2、基本操作程序： 酶制剂纯度的主要指标是： A.蛋白质的浓度?? B.酶的总量?? C.酶的总活性?? D.酶的比活性 下列哪项条件适合保存酶制剂？ A.0℃闭光?? B.室温闭光?? C.-20 ℃闭光? D.室温光照 作 业 P107思考题 1、5、6、7 第七节 酶工程简介 本章内容结束，谢谢！ * * * * （一）酶的活力测定 酶活力是指酶催化某一化学反应的能力，酶活力可以用在一定条件下所催化的某一反应的反应速度来表示，两者呈线性关系。 10 20 30 40 50 60 min 产物生成量 酶反应进程曲线 酶的活力测定和分离纯化 用一定时间内底物减少或产物生成的量来表示酶促反应速度. （二）酶活力的测定方法 1.分光光度法 利用底物和产物在紫外或可见光部分的光吸收的不同，选择一适当的波长，测定反应过程中反应进行的情况。 优点：简便、节省时间和样品，可检测到nmol/L水平的变化。 2.荧光法 主要是根据底物或产