产细菌素乳酸菌筛选鉴定和细菌素发酵条件研究.pdfVIP

中文摘要 本研究的主要目的是筛选和鉴定产细菌素的广谱菌株、优化发酵条件提高细菌素 的效价和探讨粗细菌素的生物学特性。 本实验从植物性材料中筛选到一株产细菌素的菌株R260，菌株的形态观察和生 理生化性质测定结果显示，菌体细胞呈杆状，单个或成对出现，革兰氏阳性，无芽孢： 接触酶反应、硝酸还原实验、明胶液化实验、产氨实验、水解淀粉实验、硫化氢产生 实验和、，P实验均为阴性；发酵葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、果糖和核糖。根据R260菌株 的形态特征及生理生化特性，鉴定为一株植物乳杆菌。 在排除过氧化氢和有机酸对指示菌的抑制作用后，R260菌株的发酵液对指示菌 还有强烈的抑制作用。经胰蛋白酶和胃蛋白酶处理后，发酵液抑菌活性明显下降，证 明发酵液中含有蛋白质性质的抑菌物质，即细菌素。 本研究探讨了培养基种类和组成、培养温度、培养时间、接种种龄、不同的起始 生长最好，细菌素效价最高；正交实验得出最适碳源、氮源和生长因子分别是蔗糖、 大豆蛋白胨和Fe”，它们最适浓度分别为2％、1．O％和0．02％。 环境条件对发酵影响的研究表明，最佳起始pH值为6．5；产细菌素的最适温度 为30℃：最佳接种量和种龄分别为3％的12h。从生长与pH及产细菌素的关系曲线显 示，植物乳杆菌R260在改良的MRS培养基中生长良好。在0-4h范围内pH值变化 较小，4h后pH值显著下降。R260菌株在培养7h后开始产生细菌素，20h后细 菌素产量达到最高水平，22h后细菌素的活性急剧下降。 粗细菌素的生物学特性研究表明，细菌素在pH值为5．0时活性最强，在酸性条 件下稳定；它有很好的热稳定性，在100℃加热20min仍有抑菌活性；它不仅抑制革 兰氏阳性菌，还能抑制部分草兰氏阴性菌，但对酵母菌和霉菌没有抑制作用，因此细 菌素有很广的抑菌谱；该细菌素对胰蛋白酶和胃蛋白酶敏感，但对过氧化氢酶不敏感； 细菌素可抑制苏云金芽孢杆菌的生长，但不能杀死细菌。 关键词：植物乳杆菌，筛选鉴定，发酵条件，细菌素，生物学特性 Abstract toscr嘲3strains Bacteriocin． Theaimofthis was ofproducingbroad-spectrum project titerof the in toenhance werestudiedorder FermentationCOnditionsofBacteriocin ‘ werestudied Bactefiocin and featuresofcoarse Bactariocinthe biological screenedfrom R260strainwas A LacticAcidBacteria Bacteriocin-producing R260strain