益生乳酸杆菌筛选和苹果渣发酵工程研究.pdfVIP

摘 要 研究的目的:(1)建立并采用新的乳酸杆菌筛选模型，筛选益生乳酸杆菌以作为主要的发酵 菌种;(2)建立粟酒裂殖酵母发酵降解苹果渣中的有机酸技术，为后续乳酸杆菌发酵提供适宜的 pH环境条件;(3)建立应用筛选的益生乳酸杆菌发酵苹果渣的实验室工程技术，使得发酵产物 具有抑菌活性。 主要结果和结论: 建立并采用新的乳酸杆菌筛选模型，从5个猪粪样品中筛选出的18株乳酸杆菌其中有15株 能够清除培养物中三种致病性大肠杆菌K88,K99.987P，对筛选的乳酸杆菌有关的生物特性进 行了研究。同时分离到一株酵母菌Ml,能够促进筛选乳酸杆菌的增殖和抑制大肠杆菌活性。 本研究选择到一株粟酒裂殖酵母SchizosaccharomycespombeCICC1757，该菌株能够有效降 解苹果渣中的L一苹果酸，降解率达96.26%，使得苹果渣的pH由4.0最大上升到5.0，有机酸下 降约60%:研究了粟酒裂殖酵母 c‘hizosaccharomycespombeCICC1757的发酵工艺，最佳发酵参 数为:亚硫酸用量I00mg/kg，接种量1.2xl了个/g，发酵温度28C，批次发酵时间24h，不搅 拌。 将粟酒裂殖酵母发酵后的苹果渣调整pH，接种筛选的乳酸杆菌T29和酵母MI进行联合发 酵能显著提高发酵产物的抑制大肠杆菌的活性:该联合发酵产物含有乳酸，含量为1.69%，不含 苹果酸和乙酸:乳酸杆菌T29产耐热的抗菌物质，该物质的产生与乳酸杆菌的生物量和菌体稳定 期的长短两个因素有关。发酵产物中的益生乳酸杆菌的生物量为2.2XIOBCFU/ga 经过发酵，苹果渣总黄酮保存率为92.76%,游离型黄酮的含量升高20%, 发酵的产物含有乳酸、抗菌物质、类黄酮和益生乳酸杆菌等抗生素替代品的多种元素，提高 了苹果渣的功能活性水平。 研究的意义:新的筛选模型的建立提高了益生乳酸杆菌的筛选效率，具有新型安全抗菌微生 态制剂研制的方法学意义;通过开发苹果渣利用的新途径，有助于解决苹果渣带来的环境污染问 题:通过提高苹果渣发酵饲料的抑菌活性以及微生态因子，期望能够提高苹果渣作为饲料原料或 其他的应用价值;采用固态发酵技术处理苹果渣为生物饲料符合绿色、环保、可持续发展的目标。 关键词:乳酸杆菌，筛选，苹果渣，发酵 Abstract O川ectives:(1)toestablishanewmodelofscreeningofprobioticLactobacillusspptoserveas themajorstraintofermentapplepomace(AP);(2)tosetupatechnologyofaciditydecreasingby fermentationwithSchizosaccharomycespombetoascendpHvalue;(3)tofermentAPwithprobiotic Lactobacillussppscreenedinordertomakebio-feedfromAPhaveinhibitoryactivityagainstmicrobe. Themainresultsandconclusions: Anewscreeningmodel,whichprocessispre-screening,isolation,andthenscreening,was establishedandusedtoscreenprobioticLactobacillusspp.From5samplesofpigfeces,18strainswith highinhibitoryactivityagainstEeotiwereisolated,amongthem15strainscouldexcludethreeEcolt pathogenrelatedsuchasK88,K99,987PfromculturemediaTheefficiencyofscreeningimproves significantlycomparedwithconventionalmodels.Biologicalcharacteristicsinvolvedofscreened Lactobacillussppwerestudied.Onestrainofyeast,numberedM,,whichcouldimprovethe reproducti