上调表达Smad7对大鼠腹膜纤维化模型腹膜组织细胞外基质积聚的影响.pdf

博士论文 上调Smad7对大鼠腹膜纤维化横型腹膜组织细胞外基质积聚的影响 上调表达Smad7对大鼠腹膜纤维化模型腹膜组织细 胞外基质积聚的影响 专 业：内科学(肾脏病学) 博士研究生：郝文科 导 师：余学清教授 中文摘要 腹膜透析(Peritoneal dialysis，PD)是治疗终末期肾脏病尿毒症的有效措施 之一。相对于血液透析，腹膜透析有独特的优势：安全，简便，有效；对残存 肾功能有较好的保护作用；对中分子物质清除效果好；透析开始3～5年的患者 生存率更高等等。但是，长期维持性腹膜透析所导致的腹膜结构改变和功能的 丧失仍然是目前所面临的最主要难题之一。腹膜在透析时长期与含糖非生理性 的腹透液持续接触、反复发生的腹膜炎均可导致腹膜上皮细胞的病理性改变， 并导致腹膜纤维化和腹膜功能的减退，超滤失败，最终导致PD失败。到目前 为止，临床上尚无有效方法防治长期透析导致的腹膜纤维化。因此，研究腹膜 透析相关腹膜纤维化的发生机制及防治措施，对于防止或延缓腹膜纤维化的发 生具有重要的科学意义及临床实用价值。 导致腹膜结构和功能改变的主要因素有：①高浓度葡萄糖腹透液(以下简 称高糖透析液)的低pH值和生物不相容性；②反复发生的腹膜炎：③腹腔 内抗生素的应用等。高糖透析液的不断刺激和反复的腹膜炎是最重要的原因。 已有研究证实，高糖可引起腹膜间皮细胞肥大及再生修复功能障碍，导致腹膜 间皮细胞层受损或脱落，并最终导致腹膜纤维化和腹膜功能丧失。体外研究证 明，用葡萄糖刺激腹膜间皮细胞，可使其结构和功能发生改变。表现在腹膜间 皮细胞表型改变，向肌成纤维细胞转换，失去其原有的细胞特性，角蛋白 细菌脂多糖(LPS)是最常见的诱导失控性炎症反应的主要因素之一。有研究报道 大量炎症细胞进入腹腔后，吞噬细菌，并释放氧自由基、蛋白酶、前列腺素、 博士论文 上调Smad7对大鼠腹膜纤维化模型腹膜组织细胞外基质积聚的影响 白三烯及IL一1、TNF—d等细胞因子，诱导并放大炎症反应。这些在腹膜组织内 聚集的大量炎症细胞可能是腹膜纤维化形成的重要原因。最近的研究表明IL一 1能诱导人腹膜间皮细胞发生表型改变，向成纤维细胞转分化，同时刺激细胞 外基质胶原FNmRNA表达上调。 纤维化是过度的组织修复过程，其最显著的特征是纤维母细胞的增生和细 胞外基质(Extraceltularmatrix，ECM)的过度积聚。TGF．B是己知的最主要的致 纤维化的细胞因子。它对ECM的作用包括：刺激ECM蛋白的生成和积聚；降 低蛋白酶的生成而减少基质降解；增加蛋白酶抑制物和刺激ECM蛋白受体合 并使其磷酸化入核。其中TGF．B抑制炎症反应作用是依赖Smad2途径，而其导 与受体的结合，从而对抗TGF．B的作用。有研究证实Smads信号通路的激活与 I型胶原启动子转录活性增加有关，Smad蛋白直接参与了TGF—Bl引起的胶原I 和胶原Ⅳ的转录调控。 腹膜纤维化是以腹膜间皮细胞的转分化与间皮下基质成分的积聚为病理特 征。ECM的含量与成分依赖于基质合成与降解的动态平衡。TGF．Bl可以通过 抑制基质降解酶类(如基质金属蛋白酶类Matrix 生成和增加基质降解酶类抑制物(如组织型金属蛋白酶类抑制物Tissue inhibitorsof activator inhibitors，PAl)而减少基质的降解。研究证明高糖基质中，P甜一1、 剂，其含量的增加可抑制ECM的降解。Tang等在建立的大鼠抗基底膜肾小球肾 炎模型中发现，各种胶原、纤维连接蛋白沿基膜积聚：基质溶解酶变化不明显， 而TIMP—l则比对照组升高5倍，提示TIMP—l的增多参与了ECM成分的积聚。 总之，腹膜纤维化的最主要的病理改变即是ECM在腹膜间皮下积聚，其 中高浓度葡萄糖对腹膜本身的刺激作用和腹膜反复发生的炎症是其主要诱导因 素。然而，其作用机制尚不十分清楚。基于以上研究背景，我们推测：高糖或 LPS可通过直接或间接刺激腹膜间皮上调TGF．p表达；TGF．p通过活化Smad MMPs，导致 信号通路，刺激ECM合成，