玉竹提取物A对小鼠腹腔巨噬细胞炎症因子产生的影响.pdfVIP

嬲煳必 目 录 一、摘要 中文论著摘要……………………………………………………………………l 英文论著摘要……………………………………………………………………5 二、英文缩略语……………………………………………………………………10 三、论文 前言……………………………………………………………………………11刚吾……………………………………………………………………………ll 材料与方法……………………………………………………………………12 结果…………………………………………………………………·………··16 讨论…·…………·………………………·00000……………………·……··…19 结论………·…………………………………………………………………··20 四、本研究创新性的自我评价……………………………………………………21 五、参考文献………………………………………………………………………22 六、附录 综述…………………………………………………………··………………·24 在学期间科研成绩……………………………………………………………33 致谢……………··…………………………………·………···………………34 个人简介………………………………………………………………………35 ·中文论著摘要· 玉竹提取物A对小鼠腹腔巨噬细胞炎症因子 产生的影响 目 的 玉竹(Polygonatum 根茎中含有多糖、黄酮、生物碱、甾体皂苷、甾醇、鞣质、黏液质和强心苷等多 类成分。现代药效学研究证明玉竹有抑制免疫功能、抗肿瘤、抗凝血、抗衰老和 降血糖等作用。玉竹提取物A是一种醇水提取物，经研究发现其具有抑制细胞免 疫功能和炎症反应的特点，前期试验已经证明一定浓度的玉竹提取物A可以抑制 炎症细胞释放IL．1和TNF．a等促炎症细胞因子，鉴于玉竹提取物A具有低毒和 安全的特点，进一步研究其在抗炎方面的作用和机制是非常必要的。 一氧化氮(Nitric oxide，NO)参与炎症及免疫反应等过程，在病理情况下合成 的大量NO会引起急、慢性炎症反应。内源性的NO是由一氧化氮合成酶(NO NOS，eNOS或NOS．III)、神经型(neuronal (endothelial 生型(inducible 达，尤其是巨噬细胞。iNOS主要存在于细胞质中，诱导iNOS的刺激物包括血红素、 0【等。许多实验已经证实，体内iNOS被激 脂多糖、细胞因子IFN-7、TNF．0【和IL．1 活后，释放出的大量NO与多种病理改变相关，包括组织损伤和多种炎症疾病、神 经疾病和自身免疫性疾病等。因此，选择性的抑制iNOS进而抑制过量NO产生， 将对以上疾病的治疗具有一定的应用前景。iNOS抑制剂具有阻断炎症信息传递通 道的作用，有效地抑制iNOS不仅能在初始阶段影响炎症的发生，也对抑制和终结 炎症有作用。 前期实验已经证实，玉竹提取物A在一定程度上能抑制由LPS诱导的巨噬细 胞分泌促炎症细胞因子(如IL．1和TNF．0【)，达到抑制炎症反应的作用。本实验 旨在进一步证实这一结果，同时研究玉竹提取物A能否对炎症损伤中占有重要作 用的炎症介质NO同样起到抑制作用，并且进一步揭示其内在机制。研究玉竹提 时，也检测玉竹提取物A对iNOS表达的影响。从而进一步验证玉竹提取物A对 小鼠巨噬细胞免疫功能的调节作用。 实验方法 取清洁级6—8周龄雌性BALB／c小鼠4只，无菌条件下取小鼠腹腔细胞，于 37C 5％C02条件下培养lh，去除未贴壁细胞，贴壁的巨噬细胞经胰酶消化，收 集、离心和清洗后计数细胞数，调整细胞密度为2×106／ml。台盼蓝染色，细胞活 力99％，即为提纯的腹腔巨噬细胞，备用。将提纯的腹腔巨噬细胞以2x106／ml 的密度加入96孔培养板中，实验分组包括空白对照组(巨噬细胞+培养基)和玉 竹提取物A各浓度实验组(1 x106／ml，一式5复孔。在上述培养条件下 各孔终体积均为200I