P73、p16在宫颈上皮内瘤变及宫颈癌中的表达及意义论文论文.docVIP

 1.英文缩略表 2.中文摘要 3.英文摘要 4. 正文 1)前言 2)材料和方法 3)结果 4)讨论 5)结论 6)参考文献 5. 附录 6. 致谢 7. 综述及参考文献  目  录  1 2 5 9 9 11 14 20 25 26 32 34 36 英文缩略表（abbreviations）  英文缩写 CIN CINI CINII CINIII P73 P16 HPV p53 DAB SP LOH HeLa PBS  英文全名 cervical intraepithial neoplasia cervical intraepithial neoplasia I cervical intraepithial neoplasia II cervical intraepithial neoplasia III P73gene P16gene human papilloma virus p53 gene diaminobenzidine streptavidin-peroxidase lost of heterozygosity Helacyton gartleri Phosphate-buffered saline  中文全名 宫颈上皮内瘤变 轻度宫颈上皮内瘤变 中度宫颈上皮内瘤变 重度宫颈上皮内瘤变 P73 基因 P16 基因 人乳头瘤病毒 p53 基因 二氨基连苯胺 链霉素抗生物素-过氧化物酶 杂合性缺失 人子宫颈癌细胞 磷酸缓冲液  1 P73、p16 在宫颈上皮内瘤变及宫颈癌中的表达及意义 中文摘要 研究背景 宫颈病变是女性下生殖道最为常见的病变，其中主要包括宫颈上皮内瘤变 (cervical intraepithelial neoplasia ,CIN)和宫颈癌。宫颈上皮内瘤变是Richart于1997 年首先提出，指宫颈上皮不典型增生和原位癌，即所谓宫颈癌前病变。从宫颈开 始出现病变到发展为宫颈癌是一个较为长时间连续发展的过程，即所谓的癌前病 变过程，所以早发现，早治疗，对预防宫颈癌的发生发展起着重要的作用。随着 分子生物学的迅速发展，人们认识到人类宫颈癌的形成和演变是多基因共同作用 的复杂进程。现在对于宫颈癌有关的基因研究较多的有p53，p27，p16，癌基因C-erb β-2，C-myc，bcl,凋亡抑制因子survivin，p21，p16等。目前，对于宫颈病变的的 诊断以及治疗主要依赖病理学检查结果，所以寻找宫颈病变过程中的生物学标记 物成为确诊和治疗的一个重要目标。 p73基因是近年来开始研究的肿瘤相关基因。p73基因是1997年由Kaghad在研 究胰岛素信号介质连接区时偶然发现的。其用荧光原位杂交技术发现p73定位于人 类恶性肿瘤发生的热点区域，推测p73基因可能为抑癌基因。在p73基因蛋白结构 中发现其转录激活区，DNA结合区，寡聚功能区与p53有很大程度的相似，故将其 归为p53家族。但p73蛋白结构的羧基端与p53蛋白结构不同，使得p73基因与p53 基 因在功能方面又有差异。也因此成为近年来的研究热点。关于p73在乳腺癌，肺癌， 消化道肿瘤中的相关研究也已见报道。但p73在宫颈病变中的研究报道不多见。本 实验旨在对p73在宫颈病变中的作用做一初步探索。 P16蛋白是1994年由Kamb等报道的一种新型抑癌基因．位于人类的9号染色体 92P1区。p16基因失活将导致细胞增殖失控。研究证实肿瘤抑制基因启动子区域 2 5′CpG岛甲基化是导致转录水平上基因失活的重要机制。目前已有报道在卵巢癌、 食管癌、乳腺癌、肺癌、骨肉瘤、胃癌、胰腺癌、胆囊癌、前列腺癌、头颈部恶 性肿瘤等均有p16基因的失活。p16基因在人类多种原发肿瘤和细胞系中主要表现 为纯合子缺失或突变失活，这意味着P16的表达降低。但是在宫颈癌中pl6基因的失 活与p16的表达却很复杂。究其原因可能是由于高危型人乳头状瘤病毒(HPV)表达 的E7蛋白可以与pRb蛋白结合并使之失活，而失活的Rb基因可以反馈性刺激p16表 达水平升高。Salit在探讨宫颈鳞癌高危HPV和p16表达的关系中发现，p16与HPVl6 ／18表达呈正相关，说明p16的过表达是继发于HPV表达的，提示p16蛋白表达异 常是肿瘤发生的早期事件。 目前，p73，p16在宫颈病变中的作用报道不多，两者在宫颈病变中的关系及 联合检测的价值，国内外尚无相关报道。 目的 检测子宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithial neoplasia，CIN）组织中，宫颈 癌组织中 p73 和p16的表达情况，初步探讨二者在宫颈病变中的作用及相互关系。 方法 采用13例正常宫颈作为对照组，应用免疫组化法检测55例宫颈上皮内瘤变 (CIN)，32例宫颈鳞