Gankyrin基因沉默对人卵巢癌SKOV3CDDP细胞顺铂耐药性的逆转作用和机制.pdfVIP

中国癌症杂志 2014年第24卷第1期 《 》 CHINA ONCOLOGY 2014 Vol.24 No.1 35 Gankyrin基因沉默对人卵巢癌SKOV3/ CDDP细胞顺铂耐药性的逆转作用和 机制 王倩　程堃 天津市水 阁医院妇产科 ，天津 300 120 　 　 ［摘 要 ］　 背 景 与 目的 ：卵巢癌是常见的妇科肿瘤，抗肿瘤药耐药性的产生是卵巢癌治疗失败的 主要原因之一，Gankyrin基因被认为与肿瘤耐药性密切相关，本文探讨了Gankyrin基因沉默对卵巢癌耐 顺铂细胞系SKOV3/DDP顺铂耐药性的逆转作用及机制。方法 ：应用real-time PCR技术考察Gankyrin在 SKOV3和SKOV3/DDP细胞中的表达，应用MTS法检测Gankyrin对SKOV3/DDP细胞顺铂耐受性的影响，应用流 式细胞术检测肿瘤细胞凋亡和细胞内罗丹明-123(Rhodamine-123，Rh-123)含量的变化，Western blot 和real-time PCR技术检测肿瘤细胞耐药相关蛋白MDR1、Caspase-3/8、Survivin和Bcl-2蛋白表达， Western blot法检测p53、NF-κB和PTEN蛋白表达和AKT磷酸化水平。结果 ：Gankyrin在SKOV3/DDP细 胞中表达升高，沉默Gankyrin基因后可增加SKOV3/DDP细胞对顺铂的敏感性。基因沉默前后耐药逆转 倍数(resistant factor，RF)为1.81和2.45，肿瘤细胞中Rh-123含量提高了1.73和2.42倍，细胞凋亡 率是对照组的2.23倍和4.23倍，耐药相关蛋白MDR1、Survivin和Bcl-2蛋白水平显著下降，MDR1 mRNA 表达是对照组的62.8%和21.6% ，Survivin mRNA表达是对照组的24.5%和10.3% ，Bcl-2 mRNA表达是 对照组的47.5% 和18.4% ，Caspase-3/8、p53和PTEN表达水平上升，AKT磷酸化和NF-κB水平下降。 结论 ：沉默Gankyrin基因可逆转SKOV3/DDP对顺铂的耐药性，可能与抑制药物外排，促进细胞凋亡有关，PTEN/ AKT/NF-κB/p53信号通路可能是其中心环节。 　　 ［关键词 ］　Gankyrin基因；卵巢癌；顺铂耐药 　　DOI: 10.3969/j.issn.1007-3969.2014.01.006 R737.31 A 1007-3639(2014)01-0035-06 　　中图分类号 ： 　　文献标志码 ： 　　文章编号 ： The effects and mechanisms of Gankyrin silencing on reversing the cisplatin resistance of human ovarian cancer SKOV3/DDP cell line WANG Qian, CHENG Kun (Department of Gynaecology and Obstetrics, Tianjin Shui Ge Hospital, Tianjin 300120, China) Correspondence to: WANG Qian E-mail: wangqian_sgh@126.com 　　［Abstract ］ Background and purpose: Ovarian cancer is the common gynecological cancer, and the drug resistance of anti-tumor drug was one of major reasons f