乳腺导管内乳头状瘤和导管癌中Pten、P16基因蛋白表达研究.pdfVIP

中 文 摘 要 乳腺导管内乳头状瘤和导管癌中Pten,P16基因蛋 白表达研究 摘 要 目的:乳腺导管内乳头状瘤是常见于中年妇女的一种良 性增生性乳腺疾病。本病多表现为乳腺大导管内的息肉样肿 块，约90%的病历为孤立、单发，伴有病变导管的明显扩张。 血性乳头溢液是病人的常见症状。近年来的分子生物学研究 己证实，乳腺导管内乳头状瘤为单克隆属性，属肿瘤性增生。 因此，对乳腺导管内乳头状瘤和乳腺导管癌的关系已经引 起了肿瘤工作者的重视，也从基因表达的角度进行了一些研 究工作。 Pten基因是 1997年新发现的抑癌基因，也是迄今发现 的第一个具有双特异性磷酸酶活性的抑癌基因。它分布于细 胞质和细胞核上，Pten蛋白通过阻断丝氨酸/苏氨酸激酶Akt (也称PKB)被脱磷酸化，和使局灶粘附激酶 (Fak，一个 众所周知的抗凋亡因子)减少，导致细胞停滞在G1或G2/N4 期。一些研究提示，Pten基因与失巢凋亡的过程有关，该基 因的突变和缺失与人类许多恶性肿瘤，如乳腺癌、前列腺癌 的发生有关。 P16基因是新发现的一种抑癌基因，定位于染色体9p21. 它通过抑制细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDk4)的活性，直 接参与细胞增殖周期的负调节。 为了探讨乳腺导管内乳头状瘤 QDP)的生物学特性， 以及进一步阐明乳腺导管癌与IDP之间可能存在的关系，应 中文 摘 要 用间接免疫荧光法和流式细胸技术定量检测IDP和乳腺癌组 织中Pten和P16基因在蛋白水平上的表达情况，探讨Pten, P16基因在导管内乳头状瘤癌变过程中可能的作用及意义。 病历选择: 采用1997年3月一2002年6月间河北医科大学第二医 院病理科和河北省职工医院附属医院病理科存档的蜡块包 埋组织，其中有29例乳腺根治术后病理诊断为乳腺导管浸 润癌，患者均为女性，年龄3367岁，平均49.8岁;23例 患者行局部肿瘤切除术，病理诊断为导管内乳头状瘤，均为 女性患者，年龄3269岁，平均42.5岁，以乳头溢液就诊者 占65.22%。按照中华病理学杂志编辑委员会的乳腺增生症 及乳腺癌组织学分类推荐方案及李树玲主编的 乳《腺肿瘤 学》的诊断标准进行分类，所有石蜡标本常规切片，HE染 色，由河北医科大学第二医院病理科两位高年资病理医师仔 细复诊证实。取4例正常乳腺组织作为对照。 方法: I、流式细胞术定量测定及结果判定 制备厚切片，经二甲苯脱蜡、水化后，用网搓法制备单 细胞悬液，采用间接荧光标记方法进行染色，FCM测定导管 内乳头状瘤及乳腺癌细胞中Pten,P16蛋白的表达，以正常 乳腺细胞的检测结果为标准，低于正常对照值下限为低表达 或缺失。 2、统计学处理: 本结果中样本均数采用方差分析，q检验,t检验 ，P0.01 为有显著意义。 结果:正常乳腺组织、乳腺导管内乳头状瘤和乳腺导管 中文 摘 要 浸润癌组织Pten和p16基因蛋白间接免疫荧光染色，流式细 胞术 ((FlowCytometry)定量检测结果表明: 1,Pten在正常乳腺组织中均为阳性表达(FI=1.0士0.09)。导 管内乳头状瘤组织中Pten表达的平均强度 (FI=0.85士0.13)和 阳性表达率(47.83%,11/23)均明显低于正常乳腺组织 (P0.01);进一步分析结果表明，在 11例Pten呈阳性表达 的导管内乳头状瘤中有 4例表达强度接近正常范围的下限 (0.84-0.87)。乳腺癌组Pten蛋白表达(平均FI=0.73士0.08, 阳性率10.34%)明显低于正常乳腺组和IDP组 (P0.01)a 2、与pten结果相似，在所有的正常乳腺组织中，p16均呈阳 性表达，而在工DP和乳腺癌中P16的表达均有不同程度降低。 试验结果显示导管内乳头状瘤组织p16蛋白阳性表达平均强 度(FI)为1.01士0.18，阳性率为82.61%(19/23)，均明显低于 正常乳腺组织 (P0.01)。乳腺癌组织中p16蛋白表达量 F工二0.8010.12和阳性表达