结节病和外源性过敏性肺泡炎支气管肺泡灌洗液中淋巴细胞亚群及白介素水平的测定论文.docVIP

?中文论著摘要? 结节病和外源性过敏性肺泡炎支气管肺泡 灌洗液中淋巴细胞亚群及白介素水平的测定  刖  吾  间质性肺疾病的发病率不断增高，已经成为威胁人类健康的一种重要疾病。 结节病（ＳＡＲ）和外源性过敏性肺泡炎（ＥＡＡ）是间质性肺疾病（ＩＬＤ）中较为重 要的两种，发病机制目前尚未完全明确，越来越多的研究表明细胞因子，特别是 致炎性因子可能在两种疾病的发生、发展过程中，起着非常重要的作用。现在已 有２０余种细胞因子被证明与ＩＬＤ有关。白细胞介素是其中较为重要的能作用于多 种靶细胞的炎症性单核细胞因子。白细胞介素４（ＩＬ一４）、白细胞介素２（ＩＬ一２）分 属于两个不同类型的细胞因子。Ｔｈｌ型细胞因子与Ｔｈ２型细胞因子的比例失衡在 ＩＬＤ中的作用越来越为人们所重视。本研究的目的就是探讨ＩＬ．４、ＩＬ．２在ＩＬＤ进 程中所起的作用和它们的临床意义，以期待对ＩＬＤ的发病机制有更全面的认识。 实验材料 １、研究对象 （１）ＳＡＲ组：ＳＡＲ组患者２４名，所有患者均经临床、肺功能检查、血气分 析、肺ＨＲＣＴ检查，并经支气管肺泡灌洗检查（ＢＡＬ）和经支气管肺活检（ＴＢＬＢ） 除外其他问质性肺疾病。符合美国胸科学会（ＡＴＳ）和欧洲呼吸学会（ＥＲＳ）共同 提出的有关ＳＡＲ的非创伤性标准。 （２）ＥＡＡ组：所有患者均经临床、肺功能检查、血气分析、肺ＨＲＣＴ检查， 并经支气管肺泡灌洗检查（ＢＡＬ）和经支气管肺活检（ＴＢＬＢ）除外其他间质性肺疾 病。所有患者检查前未经糖皮质激素及其它免疫抑制剂治疗。 ２、实验仪器 Ｏｌｙｍｐｕｓ２６０型纤维支气管镜，Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ３２Ｒ离心机，ＢＩＯ—ＲＡＤ酶标仪。 ３、实验试剂 ＩＬ．４和ＩＬ．２试剂盒均购自上海吉泰生物医学公司。 实验方法 １、应用Ｏｌｙｍｐｕｓ２６０型内径５．９ｍｍ的电子支气管镜做支气管肺泡灌洗。 ２、ＢＡＬＦ用２层的无菌纱布过滤后注入经高压消毒的塑料离心管中，离心后 注入无菌透析袋，浸入５０％的聚乙二醇溶液中，２４小时后加入生理盐水（量为原 ＢＡＬＦ量的１／１０），取浓缩液封盖冷冻保存（－７０＂Ｃ）备用。于支气管肺泡灌洗后立 即采肘静脉血素３ｍｌ，对静脉血进行离心，取上清冷冻保存（－７０＂Ｃ）备用。检测 时取其上清进行ＩＬ．４和ＩＬ．２水平测定。 ３、用酶联免疫吸附测定法检测血清和ＢＡＬＦ中ＩＬ．４和ＩＬ．２水平。 ４、统计学处理：所得数据以ｘ±ｓ表示，采用ｓｐｓｓ软件包行ｔ检验。 实验结果 ＳＡＲ组与ＥＡＡ组ＢＡＬＦ及血清中ＩＬ．４、ＩＬ．２的水平及比较。 ＥＡＡ组患者外周血中ＩＬ．４水平明显高于ＳＡＲ组外周血中ＩＬ．４水平。ＳＡＲ组 外周血ＩＬ．２水平与ＢＡＬＦ中的Ｎ％呈正相关，ＥＡＡ组ＢＡＬＦ中ＩＬ－４水平与Ｍ％ 呈正相关。  讨  论  虽然引起ＩＬＤ的发病机理目前尚未完全明确，但是进来研究人员对ＩＬＤ的发 病机制已有了越来越深入和广泛的了解。研究表明，在某种致病因素的作用下， 细胞因子特别是致炎性因子可能在本病的发生、发展过程中起着非常重要的作用。 现在已有２０余种细胞因子被证明与ＩＬＤ有关。白细胞介素是其中较为重要的能作 用于多种靶细胞的炎症性单核细胞因子。ＩＬ．４是特征性Ｔｈ２型细胞因子，ＩＬ．２为 重要的Ｔｈｌ型细胞因子。Ｔｈｌ型细胞与Ｔｈ２型细胞的比例失衡在间质性肺疾病中 的作用越来越为人们所重视。研究表明，Ｔｈ２细胞来源的因子如ＩＬ．４等可扩大炎 症反应引起肺结构重塑，刺激肺成纤维细胞增生伴胶原和纤维素沉积增多引起肺 泡壁基底膜增厚和弥漫性上皮下纤维化。研究发现，损伤的肺泡上皮细胞高表达 ＩＬ．４，ＩＬ．４是成纤维细胞的趋化因子，诱导成纤维细胞增殖并增加细胞外胶原生成， ２ 且通过抗凋亡作用促进纤维化。我们的研究结果显示：ＳＡＲ组患者的ＢＡＬＦ中ＩＬ－２ 及ＩＬ．４水平与ＥＡＡ组患者差别无显著性。ＳＡＲ患者的外周血中的ＩＬ．４水平明显 低于ＥＡＡ组。说明ＩＬ一４的增高是一种全身行为。ＩＬ．２主要由活化的巨噬细胞、 树突状细胞和中性粒细胞产生，有致炎和免疫调节作用。在Ｔｈ细胞亚群的分化中 发挥重要作用，是Ｔｈｌ细胞生长所必需的细胞因子，可以促使Ｔｈｌ细胞的增殖分 化产生Ｔｈｌ型细胞因子，抑制Ｔｈ２细胞的增殖分化。ＩＬ．２可以诱导活化的Ｔ细胞 和ＮＫ细胞分泌ＩＦＮ．Ｙ和ＴＮＦ。通过本实验观察ＳＡＲ患者ＢＡＬＦ中ＩＬ．４水平与 ＥＡＡ组中的ＩＬ．４水平无明显差异（Ｐ＞０．０５），而外周血中的ＩＬ．４水平明显低于 ＥＡＡ组（Ｐ＜０．０１），这种现象说明ＥＡＡ患者Ｔｈｌ型细胞因子减少，ＳＡＲ患者Ｔｈｌ 型细胞因子增高是一种局部现象而非全身性，同时也在一定程度上说明Ｔｈｌ型细 胞因子ＩＬ．２可以抑制成纤维细胞的增殖和纤维组织的生成。总之，越来越多的证 据表明：Ｔｈ