2013执业兽医资格考试微生物学肠杆菌科.ppt

第八章 肠杆菌科(Enterobacteriaceae) 肠杆菌科细菌共同生物学特性 形态与结构： 培养： 生化反应： 抗原结构： 抵抗力： 变异： 肠杆菌科概述 肠杆菌科是由一大群生化和遗传上相关的中等大小杆菌所组成。 其共同特性为： G－；非抗酸性； 中等大小：0.3-1.0×1.0-6.0μm； 无 芽 胞；有或无荚膜；有鞭毛； 除塔特姆氏菌属为一端鞭毛或侧生外，其余周生鞭毛。 兼性厌氧； 绝大多数在普通培养基上生长良好，一般都能在麦康凯培养基上生长； 有机化能营养，呼吸型和发酵型代谢，不嗜盐。发酵D-葡萄糖、其它碳水化合物及多羟基醇时产酸或兼产气。 除志贺氏菌属的1个血清型及从昆虫分得的一种致病杆菌外，都产生过氧化氢酶，但氧化酶均为阴性。 除某些欧文氏菌及少数耶尔森氏菌的菌株外，均能还原硝酸盐。 DNA中G+Cmol%为38—60。 代表菌属为埃希氏菌属（Escherichia）。 ETEC是致人和幼畜腹泻最常见的病原性大肠杆菌； 与致病力相关的毒力因子有粘附素性菌毛和肠毒素， 二者密切相关且缺一不可，否则不引起腹泻或只致轻度腹泻。 主要毒力因子 肠毒素（Enterotoxin） 黏附素性菌毛 1、粘附素性菌毛 是一类特有菌毛，能粘附于宿主小肠上皮细胞; 又称为粘附素和定居因子。对其抗原亦相应称作粘附素抗原或定居因子抗原（CFA）。 动物ETEC的粘附素主要有K88、K99、987P和F41，其次为F42和F17。 粘附素不是腹泻的直接致病因子，但它是感染的首要毒力因子。 ETEC必须首先粘附于宿主的小肠上皮细胞，才能避免肠蠕动和肠液分泌的清除作用，并得以在肠内定居和繁殖，从而增强了细菌的致病性。 2、肠毒素（enterotoxin） 什么是肠毒素：ETEC分泌到胞外的一种蛋白质性毒素。 分类：对热的耐受性 不耐热肠毒素（heat-labile enterotoxin，LT）； 耐热肠毒素（heat-stable enterotoxin，ST）。 动物ETEC中，只有猪源K88+菌株能同时产生LT和ST，其它菌株仅产ST。 ETEC的致病机制 LTⅠ的作用机理 LT-Ⅱ的作用机理 LT-Ⅱ与LT-Ⅰ作用方式相似； 但结合的受体不同： LT-Ⅱa——GD1b神经节苷脂 LT-Ⅱb——GD1a神经节苷脂。 ST的作用机理 STⅠ的毒性作用 VTEC——产生Vero细胞毒素的病原性大肠杆菌。 VTEC有两类毒力因子 致水肿病2型产类志贺毒素（SLT-2v） 黏附性菌毛：F107/F18 1、粘附性菌毛 VTEC 的粘附性菌毛是F107菌毛。 大多数猪水肿病菌株（主要为O139、O141、O138）都有F107菌毛。 F107菌毛是一个重要的毒力因子，有助于VTEC在猪肠粘膜上皮细胞上定居和繁殖。 2、志贺氏菌样毒素Ⅱ型变异体（shiga-like toxin variant，SLT-Ⅱv或SLT-Ⅱe） SLT-Ⅱe是VTEC产生的一种蛋白质性细胞毒素，引起猪水肿病的直接毒力因子。 仔猪水肿病是一种肠毒血症，其发病机制为： 大肠杆菌以其菌毛（如F107）粘附于小肠上皮细胞； 细菌定居和大量繁殖； 在肠内产生SLT-Ⅱv并被吸收； SLT- Ⅱe的作用 毒素SLT-Ⅱ的吸收：肠道； B亚单位与上皮细胞的Gb4受体特异性结合； A亚单位进入细胞内并造成细胞死亡和组织病变。 由于SLT-Ⅱe也是一种血管毒素，可引起血管内皮细胞损伤，血管通透性改变，导致病猪出现水肿和典型的神经症状。神经症状是由脑水肿所致，并非是毒素对神经细胞的直接作用。 大肠杆菌致病性有关的其他毒力因子 内毒素（LPS）、具有抗吞噬作用的K抗原、溶血素、大肠菌素V、血清抵抗因子、铁离子清除因子等； 在不同动物大肠杆菌病的发生中可能起到不同的致病作用。 畜禽致病性大肠杆菌的分离与鉴定程序 血清型鉴定 K抗原的鉴定； O抗原的鉴定； 菌毛抗原的鉴定； H抗原一般不作鉴定。 ETEC肠毒素检测 常用的LT检测方法有： Y1小鼠肾上腺细胞或中国地鼠卵巢细胞（CHO）培养法； 平板免疫溶血试验； 夹心红细胞免疫试验； 夹心ELISA； 兔回肠结扎肠试验； 兔皮肤蓝斑试验法等。 检测ST常用方法有： 乳鼠胃内投服试验； GM1-ELISA等。 SLT-Ⅱe的检测 对SLT-Ⅱe的检测目前主要用： 粗提或纯化毒素的Vero细胞毒性试验和小鼠神经毒性试验，并以抗SLT-Ⅱe血清或单克隆抗体做中和试验鉴定之； PCR方法对SLT-Ⅱe基因的扩增。 沙门氏菌的分类 根据新近的沙门氏菌的分类方案，本属菌现可分为两个种： 肠炎沙门氏菌（S.enterica） 邦戈尔沙门氏菌（S.bongori） 肠炎