山葡萄成熟果皮cDNA文库的构建及EST分析.pdfVIP

摘要 摘要 山葡萄是东北地区酿造葡萄酒的主要原料，用山葡萄酿造的葡萄酒口味独特，深受 国内外消费者的欢迎。为了研究山葡萄成熟过程中相关基因的表达情况，鉴定出与山葡 萄成熟、香气物质形成、花色苷合成及抗病相关的基因，进行了以下研究： 离出高质量的RNA，可以用于下一步的分子生物学研究。以山葡萄成熟果皮为材料， SMARTTMcDNA 采用Creator Library kb之间。经随机测序， 库的库容量为1．001x106，重组率为94％，插入片段在0．25--2．0 和功能基因组学的研究奠定了基础。 EST分析结果表明，文库中未知功能基因(function (metabolism)的基因为20．81％，与细胞救援与防御(cell 为5．15％，信号转导(signal 5．61％，蛋白合成(protein activity regulation)基因为15．43％，细胞结构(cell (transport)基因为6．55％，转录(transcription)基因为5．15％。 在文库中，核糖体蛋白的数量最多，为28个，占全部EST序列的5．38％，有比较 多的核糖体蛋白说明在山葡萄果皮生命活动过程中，蛋白质合成活动旺盛。文库中与花 色苷合成相关的基因包括查尔酮合酶(chalcone ammonia-lyase，PAL)、谷胱甘肽S．转移酶(glutathione (Phenylalanineammonia．1yase)、醇脱氢酶(Alcohol (Ripening．relatedprotein 个和山葡萄抗病相关的基因，为以后更好的研究山葡萄的抗病机制提供了基础。 关键词 山葡萄；eDNA文库；表达序列标签 Abstract Abstract 所t／samurensisisthemainmaterialthatmakeswineinthenortheast made region，wine has tasteand thedomesticandintemational byamulgrapespecial deeplypopularamong consumer．Fortherelated theamur mature studying geneexpressionduring grape process， relatedof offlavorand of identifyinggenematurity,anti—disease，production biosynthesis onthe research： anthocyanins，carriedfollowing TotalRNAWasextractedthreemethodsandtheCTABmethodCan by separatehigh Canbeusedforthenext ofmolecularsearch．eDNA RNA，and quality step biology library fromtheamur wasconstructedCreatorSMARTTMeDNA Co