久效磷对雄性金鱼环境雌激素效应研究.pdfVIP

久效磷对雄性金鱼环境雌激素效应研究 摘 要 1996年以来，环境雌激素对野生生物和人类的影响受到了各国政府和科学界 的广泛重视。欧盟、美国和日本政府都已启动了环境雌激素筛选体系的国家级课 题，着手建立环境雌激素的离体和活体筛选方法。但目前为止，主要集中于环境 中持久性有机污染物如有机氯农药和烷基酚类化合物的筛选上，而我国是农业大 国，大量地使用了有机磷农药，其残留毒性及环境雌激素效应的研究还尚未见报 道。因此，本文选择国内广泛使用的有机磷农药一一久效磷，以金鱼为模型生物， 以雄性金鱼卵黄原蛋白产生、精巢支持细胞v—GTP酶活性，并辅以生殖轴线器 官一一垂体和精巢超微结构的变化，在国内首先建立了有机磷农药环境雌激素效 应的筛选体系，并首次确认久效磷具有环境雌激素活性。 本文采用腹腔注射17声一雌二醇诱导雄性金鱼卵黄原蛋白的产生，注射浓度为 o05 g-iBW；利用卵黄原蛋白富含磷酸、脂和糖基团的特点，进行血浆样品的 mg 常规聚丙烯酰氨凝胶电泳，通过对卵黄原蛋白特性基团磷、脂和糖蛋白的染色， 确定了卵黄原蛋白在电泳图谱上的位置， 开发了常规聚丙烯酰胺凝胶电泳法定性 卵黄原蛋白的简便方法。电泳结果表明， 经过2周的1邛一雌二醇暴露，诱导雄 2 性金鱼产生了卵黄原蛋白，并通过ELISA检测卵黄原蛋白的平均含量为690 ng 7 ml一，和对照组雄性金鱼平均含量为10 ng ml‘1的差异极显著(p0．01)，比雌性 对照组检出量285．5 ngml。1高l倍多，并且1筇一雌二醇可以诱导雄性金鱼血浆钙 离子和血浆总蛋白含量增加。 o01，0 1和O 5mgL。1久效磷暴露雄性金鱼21天，各暴露组均诱导了雄性金 鱼卵黄原蛋白的产生；并利用酶链免疫吸附法定量了卵黄原蛋白的平均含量分别 为2440、833 5 l和479ml一，卵黄原蛋白的含量随着浓度的增加呈倒“u”型 ng 曲线。并且3个浓度的久效磷均可以诱导雄性金鱼血浆总蛋白含量的增加。 久效磷对金鱼精巢组织结构的破坏主要表现为：精小叶基膜断裂；Leydig氏 细胞出现肥大现象i精原细胞膨胀。随着久效磷暴露浓度的增加对支持细胞Y一谷 氨酰转移酶活性的抑制作用明显加强。精小叶组织结构的损伤和Y一谷氨酰转移酶 活性的降低，表明久效磷具有一定的生殖毒性即环境雌激素效应。 (TSH)三种分泌细胞、生精细胞和精子的影响主要表现为对膜系统的损伤。三 种中腺垂体分泌细胞都出现核膜水肿、内质网水肿，甚至出现局部溶解现象。久 效磷对精原细胞的损伤最为严重，细胞膜和核膜水肿，高浓度暴露组的细胞膜雨1 核膜溶解，线粒体的嵴也有溶解现象；但久效磷对精母细胞和精子细胞的损伤并 不明显，主要表现为膜系统的轻微水肿。久效磷可以使金鱼精子细胞质膜溶解， 出现间断性断裂；有的精子头部变形，顶部出现凹陷；少量精子颈部中心粒复合 体溶解；精子颈部线粒体有溶解现象，精子尾部的膜结构断裂。支持细胞核染色 质凝聚程度增加并出现不规则低电子密度区；核膜溶解，细胞问连接进一步拉开。 关键词： 久效磷；金鱼；卵黄原蛋白；环境雌激素 Ⅱ of on Effect Environmental Monocrotophos The Estrogen Male