大肠杆菌单链结合蛋白SSB重组功能研究.pdf

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致 谢 本文是在导师邱立友教授的悉心指导下完成的。从课题的选取,实验的设计、 到研究方法以及论文的修改到完成,都倾注着导师无数的心血。三年来,导师勤 谨的治学态度,宽以待人严于律己的高尚品格深深的影响着我,使我受益匪浅, 终身难忘。在此毕业之际,谨向导师致以我崇高的敬意和衷心的祝福! 衷心感谢贾新成教授、申进文教授、吴坤教授、陈红歌教授等在学业上给予 我的指导和生活中对我的帮助,同时感谢戚元成老师、高玉千老师以及微生物教 研室的全体老师在学业上给予我指导和在生活中给予我关心。 感谢实验室的同学张朝辉、黄涛、张国胜、徐柯、孙强、曹玉博、刘天翔、 周巍巍、李银凤、关园园、柴冉等在实验上的帮助和指导。在此,谨向你们表示 最诚挚的祝福, 值此论文完成之际,最后谨将此文献给我的父母、感谢他们辛勤的劳动支持 我度过研究生生活。感谢所有关心我的亲朋好友,漫漫求学路上,你们给了我无 微不至地关怀、当我在遇到困难时给了我强大的支持和动力,使我能执着前进。 再次表示最真挚的谢意! 李晓举 2013年5月 目录 摘要………………………………………………………………………………………………………………………………一1 l文献综述…………………………………………………………………………………………2 1.1引言…………………………………………………………………………………………2 1.2大肠杆菌……………………………………………………………………………………..2 1.2.1大肠杆菌概述………………………………………………………………………….2 1.2.2大肠杆菌特点………………………………………………………………………….2 1.2.3大肠杆菌在基因工程中的应用……………………………………………………….3 1.3同源重组……………………………………………………………………………………3 1.4本章小结……………………………………………………………………………………5 2大肠杆菌RECA突变株DH5A中质粒分子内的同源重组…………………………………一6 2.1引言……………………………………………………………………………………………6 2.2实验材料…………………………………………………………………………………….6 2.2.1菌株与载体…………………………………………………………………………….6 2.2.2培养基配方…………………………………………………………………………….7 2.2.3试剂和药品…………………………………………………………………………….8 2.2.4仪器和设备…………………………………………………………………………….8 2.3实验方法……………………………………………………………………………………8 2.3.1大质粒G7转化DH50t…………………………………………………………………8 2.3.2大质粒G7转化K12…………………………………………………………………..8 2.4实验结果……………………………………………………………………………………8 2.4.1DH50t菌株转化子中不同培养时间质粒大小变化……………………………………8 2.4.2转化子7号质粒大小变化时程………………………………………………………1l 2.4.3转化野生菌株K12后质粒火小随时间变化………………………………………..12 2.5本章小结…………………………………………………………………………………..12 3大肠杆菌DH5ARECA敲除突变株中质粒分子内同源重组……………………………….13 3.1引言………………………………………………………………………………………..13 3 3.2实验材料…………………………………………………………………………………..1

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