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致 谢
本文是在导师邱立友教授的悉心指导下完成的。从课题的选取,实验的设计、
到研究方法以及论文的修改到完成,都倾注着导师无数的心血。三年来,导师勤
谨的治学态度,宽以待人严于律己的高尚品格深深的影响着我,使我受益匪浅,
终身难忘。在此毕业之际,谨向导师致以我崇高的敬意和衷心的祝福!
衷心感谢贾新成教授、申进文教授、吴坤教授、陈红歌教授等在学业上给予
我的指导和生活中对我的帮助,同时感谢戚元成老师、高玉千老师以及微生物教
研室的全体老师在学业上给予我指导和在生活中给予我关心。
感谢实验室的同学张朝辉、黄涛、张国胜、徐柯、孙强、曹玉博、刘天翔、
周巍巍、李银凤、关园园、柴冉等在实验上的帮助和指导。在此,谨向你们表示
最诚挚的祝福,
值此论文完成之际,最后谨将此文献给我的父母、感谢他们辛勤的劳动支持
我度过研究生生活。感谢所有关心我的亲朋好友,漫漫求学路上,你们给了我无
微不至地关怀、当我在遇到困难时给了我强大的支持和动力,使我能执着前进。
再次表示最真挚的谢意!
李晓举
2013年5月
目录
摘要………………………………………………………………………………………………………………………………一1
l文献综述…………………………………………………………………………………………2
1.1引言…………………………………………………………………………………………2
1.2大肠杆菌……………………………………………………………………………………..2
1.2.1大肠杆菌概述………………………………………………………………………….2
1.2.2大肠杆菌特点………………………………………………………………………….2
1.2.3大肠杆菌在基因工程中的应用……………………………………………………….3
1.3同源重组……………………………………………………………………………………3
1.4本章小结……………………………………………………………………………………5
2大肠杆菌RECA突变株DH5A中质粒分子内的同源重组…………………………………一6
2.1引言……………………………………………………………………………………………6
2.2实验材料…………………………………………………………………………………….6
2.2.1菌株与载体…………………………………………………………………………….6
2.2.2培养基配方…………………………………………………………………………….7
2.2.3试剂和药品…………………………………………………………………………….8
2.2.4仪器和设备…………………………………………………………………………….8
2.3实验方法……………………………………………………………………………………8
2.3.1大质粒G7转化DH50t…………………………………………………………………8
2.3.2大质粒G7转化K12…………………………………………………………………..8
2.4实验结果……………………………………………………………………………………8
2.4.1DH50t菌株转化子中不同培养时间质粒大小变化……………………………………8
2.4.2转化子7号质粒大小变化时程………………………………………………………1l
2.4.3转化野生菌株K12后质粒火小随时间变化………………………………………..12
2.5本章小结…………………………………………………………………………………..12
3大肠杆菌DH5ARECA敲除突变株中质粒分子内同源重组……………………………….13
3.1引言………………………………………………………………………………………..13
3
3.2实验材料…………………………………………………………………………………..1
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