DAPK1抑制肿瘤细胞转移及其调控机制研究.pdfVIP

DAPKI抑制肿瘤细胞转移及其调控机制的研究中文文摘 DAPKl抑制肿瘤细胞转移及其调控机制的 研究 摘要 associated 死亡相关蛋白激酶1(death kinasel，DAPKI)是一种 protein 新颖的与肿瘤抑制相关的Ca”一CaM依赖性的丝氨酸／苏氨酸激酶。3APKl基因是 S)起着关键作用，与各种因素引起的细胞 剥离造成的死亡(失巢凋亡，anoiki 凋亡有着广泛联系，涉及不同的凋亡途径。 本研究通过克隆和重组DAPKl基因，导入高转移的非小细胞肺癌中，观察 DAPKl抑制肿瘤细胞的生长和转移侵袭能力，并探讨了其中的机制。同时探讨在 表达调控提供一些新思路。 主要研究结果如下 1．从K562细胞中克隆得到DAPKI基因。测序表明，从K562细胞成功扩增 核苷酸多态性(SNP)位点，SNP 胞。研究表明转染的DAPKI基因可以诱导Raji细胞凋亡。 胞生长比空白组及pcDNA3．1转染组减缓；体外软琼脂克隆形成率下降(Pd)．05)： 染组是空白组的95．7％；pcDNA3．卜DAPKI转染组粘附能力是空白组的62．7％， s细胞胶原酶分泌影响不明显。 bcDNA3．1转染组是空白组的91．2％；DAPKI对PGCI DAPKl基因的过表达可以在一定程度上逆转PGCI。细胞的恶性表型：使PGCI搏H胞 DAPKl抑制肿瘤细胞转移及其调控机制的研究一中文文摘 生长受抑制，体外侵袭、运动和粘附能力下降。DAPKl抑制细胞生长，体外侵 袭、运动和粘附能力可以被IFN—Y所增强。 pmol／L)不能 Mn2+与否具有显著差别(PO．05)；caspase的广谱抑制剂crmA(100 完全抑制DAPKl诱导的细胞凋亡，与无crmA组无显著差别(PO．05，n=3)。 4．构建表达DAPKl 负调控作用。 隆抗体识别的蛋白质条带被检测出。 6．丁酸钠诱导Raji细胞DAPKl基因表达，抑制FAK基因的表达。3一氨基哒嗪 可以抑制丁酸钠诱导Raji细胞凋亡。丁酸钠处理后，Raji细胞由成团悬浮生长 变成贴壁生长，并可见细胞由圆形转变为成纤维状或星形，生出的纤维状轴丝比 胞体长，并有再次分支现象，胞体和纤维分支中有液体状小泡，电镜下可见有明显 的空泡。抑制Raji细胞贴壁增加细胞凋亡比率。 结论及研究意义 1． 转染的DAPKl基因可以诱导Raji细胞凋亡。DAPKl基因的过表达可 以在一定程度上逆转PGCl擤8胞的恶性表型。提示DAPKl在肿瘤的基 因疗法可能作为目的基因。 II DAPKI抑制肿瘤细胞转移及其调控机制的研究一中文文摘 增加，同时Bcl一2蛋白含量减少。为DAPKI的可能作用机制提供新 观点。 o诱导人胚肺成纤维细胞凋亡。 pcDNA3．卜DCT能抑制TNF pcDNA3．1一DCT可能在抑制细胞(例如正常上皮细胞，内皮细胞，神 经元)凋亡方面具有应用价值。 Raji细胞DAPKl表达调控不仅是启动子区域的甲基化，可能还存在 由于转录后mRNA不同的拼接翻译出不同的DAPKl蛋白部分片段调 控。为研究DAPKI表达调控提供一些新观点。 丁酸钠可以诱导Raji细胞表达DAPKl，诱导Raji细胞发生失巢凋 t：。 关键词：死亡相关蛋白激酶1；肿瘤转移；细胞凋亡；基因调控；甲基化 III ofTumorCells 、Studies M