旋覆花素抑制内皮剥脱和高脂血症诱导活性氧产生及生化机制研究.pdfVIP

中文摘要 旋覆花素抑制内皮剥脱和高脂血症诱导的活性氧产 生及生化机制的研究 摘 要 目的：活性氧(reactive oxygenspecies，ROS)在内皮 剥脱后再狭窄和动脉粥样硬化等心血管疾病中扮有重要的 角色。ROS能损伤内皮细胞(endotheliacell，EC)，促进血 smoothmuscle 管平滑肌细胞(vascular cell，VSMC)的增殖 acid， fatty 和凋亡。它与多不饱和脂肪酸(polyunsaturated PUFA)发生反应生成的脂质过氧化物如丙二醛 脂蛋白一胆固醇(LDL—C)进行氧化修饰形成的ox—LDL易被 巨噬细胞吞噬形成泡沫细胞，在动脉粥样硬化的形成和发展 中具有重要作用。ROS的产生及作用的发挥与炎症密切相 关。某些炎症因子可以促进血管壁细胞ROS的产生，而ROS 又可以促进一些炎症因子的转录和表达，加重炎症进展。两 者相互作用最终导致血管疾病的发生。旋覆花素是我们从中 药旋覆花中经氯仿抽提得到的有效部位，其中的有效成分是 证实其能够抑制内皮剥脱后再狭窄的炎症反应。本实验通过 观察ABL对内皮剥脱后再狭窄模型大鼠及高脂血症模型大 鼠氧化状态及血脂的影响，进一步了解ABL的药效。 方法： l动物模型的建立及分组 中文摘要 (1)高脂模型组：将雄性SD大鼠随机分为三组：正常组， 高脂组，高脂给药组。正常组普通饲料饮食；高脂组用高脂 饲料以15 g／只／天喂养60天；高脂给药组：高脂饲料喂养40 天后，灌胃服用ABL粗品，剂量为26 mg／kg体重／天。 (2)内皮剥脱模型组：将雄性SD大鼠随机分为三组：正常 组，手术对照组，手术给药组。正常组普通饲料饮食；手术 对照组行大鼠主动脉内皮剥脱术，术前3天及术后灌胃服用 无ABL的溶液。手术给药于术前3天及术后灌胃服用ABL 粗品，剂量为26mg／埏体重／天。手术对照组及手术给药组 分别于术后1天、3天、7天、14天、21天处死。 2标本处理 各组大鼠均从股动脉放血处死，收集血液标本，分离血 清；迅速取出肝脏组织，制备肝匀浆，一20℃备用；取高脂模 型组肝脏做病理学切片观察脂肪沉积情况；取手术模型组大 鼠主动脉中段血管做病理学切片，染色观察血管内膜增生情 况并进行形态测量学分析。 3血脂含量测定 用全自动生化分析仪测定，具体操作按试剂盒说明书进 行。 antioxidant 4总抗氧化能力(total c印acity，1AOC)、超氧 化物歧化酶(superoxide (malondialdehvde，MDA)的测定 用比色法，具体操作按试剂盒说明书进行。 5胱硫醚酶(cystathionineB—synthase，CBS)的测定 在反应缓冲液中加入丝氨酸、吡哆醛磷酸及肝匀浆上清 液适量，37℃孵育5min后，再加入L．同型半胱氨酸，37℃ 中文摘要 孵育60min，用50％三氯乙酸终止反应。取上清加入茚三酮 充分反应，用722型分光光度计于465nm波长测定反应液吸 光度值，同时设定底物对照和肝匀浆上清液对照。 结果： l血脂浓度变化 与正常组相比，高脂组血清TC和TG水平显著升高(P 水平。 2形态学变化 正常组大鼠肝组织无脂肪变性；高脂组肝细胞质内充满 大量大小不等的圆形脂滴，呈明显脂肪变性。高脂给药组肝 细胞质内空泡较少，脂肪变性程度较高脂组减轻。 大鼠主动脉病理切片显示，内皮剥脱术后l天，手术给 药组及手术对照组内膜完全消失，表明剥脱完全。术后3天， 手术对照组内膜表面可见增