雌激素对大鼠肾缺血—再灌注损伤保护作用研究.pdfVIP

中文摘要 雌激素对大鼠肾缺血一再灌注损伤 保护作用的研究 摘 要 研究背景：在泌尿外科领域一些复杂的肾脏手术中，如 肾肿瘤的肾音B分切除术(NephronSparing 阻断肾脏血流是必要的，开放循环后必然会造成肾脏缺血再 灌注损伤，同时更重要的是肾脏缺血再灌注损伤也是造成移 植肾功能延迟恢复(DGF)的重要原因。如何减轻和预防肾脏 缺血再灌注损伤，一直是人们对肾损伤保护的主要研究课 题。据文献研究报道，雌激素可能通过抗氧化作用，减轻再 灌注区中性粒细胞浸润及细胞因子的释放等途径对心、脑、 肝脏、肠等多种器官的缺血再灌注损伤起到防治作用。而目 前尚无雌激素对肾脏缺血再灌注损伤干预影响的研究。 目的：本实验应用夹闭大鼠双侧肾蒂造成肾缺血一再灌注 损伤模型，通过检测缺血24h后l肾功能及血清TNF．c【含量 的变化，结合常规病理检查，电镜下肾组织超微结构的改变， 以及应用免疫组化方法进行肾组织标本NF，KB检测来探讨 术前应用雌激素对肾缺血再灌注损伤的保护作用及可能的 作用机理。 、 事科学医学院实验动物中心提供)，体重300—350g，随机分 m1，C组在术前3天每天腹腔注射苯甲酸雌二醇40 mg／kg／d。 中文摘要 40 m∥k∥d。术日将大鼠以O．4％氯胺酮100mg／kg腹腔内注 射麻醉后，沿腹部正中切口进腹，小心分离双侧肾蒂，B组 和C组大鼠无损伤动脉夹阻断双侧肾蒂，造成双肾缺血，45 分钟后松开动脉夹，实行再灌注，假手术组以相同手术方法 仅暴露双侧肾脏并分离肾周组织，不夹闭双侧肾蒂。其后缝 合切口，自由摄食，自然光照。于再灌注24h后心脏取血3 m1，备血’肾功能检查及血清n师．0【检测。摘取左肾，切取 2／3皮质福尔马林固定，常规石蜡切片，以备常规染色和免 疫组化用。剩余l／3皮质固定于2．5％戊二醛磷酸缓冲液中， 行透射电镜检查。 。 用酶法测再灌注后24h血清BuN，Cr；采用酶联吸附免 疫法(ELISA法)按照说明书步骤进行测定血清n盯一c【；常 规石蜡切片，作既染色，在船．2型0lympus光学显微镜 下观察其组织学改变并按paller标准评分；采用链霉素抗生 物蛋白过氧化酶连结法(sP法)按照说明书步骤逐步进行 NF．KB免疫组化检查，光镜下观察，并使用图像分析系统计 算免疫组化染色阳性的细胞面积，得出NF．KB阳性面积密 度；2．5％戊二醛磷酸缓冲液固定左肾组织，按透射电镜标本 制作常规，经漂洗，固定，再漂洗、脱水、浸透、包埋、聚 合、切片、染色等步骤，在日立H7500型电镜下观察其超微 结构改变。 结果以均数士标准差表示，所有数据均在微机上用 spssll．5统计软件包完成。采用方法：计量资料采用单因素方 差分析，尸值小于O．05定为统计学有显著差异。 结果： 1再灌注24h后血肌酐、尿素氮的变化 中文摘要 vs119．33 雌激素治疗组血肌酐与对照组比较(95．74士5．1 土14．9)明显降低，差异有显著性(PO．05)。雌激素治疗组血 vs 尿素氮与对照组比较(10．07士1．617．56土3．1)也明显降低， 差异有显著性俨O．05)。 2血清n师．C【的改变 雌激素治疗组和对照组大鼠血清n师．0【水平明显高于 假手术组(PO．05)，但雌激素治疗组n旺．Q升高的程度远低 vs33 于对照组(235．17土65．881．06土48．91)，其差异有统计学 意义俨O．01)。 3既染色和NF一心免疫组化检测 雌激素治疗组光镜下观察病理变化较对照组有明显改